改變氧化-抗氧化水平對(duì)體外培養(yǎng)胃癌細(xì)胞增殖的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  本實(shí)驗(yàn)從何首烏塊根中提取何首烏總苷(polygonum multiflorum totalglycoside,PMTG),通過調(diào)節(jié)抗氧化劑-何首烏總苷(PMTG)和過氧化劑-過氧化氫(hydrogen peroxide,HP)濃度改變過氧化-抗氧化水平,觀察不同過氧化-抗氧化水平對(duì)體外培養(yǎng)胃癌細(xì)胞株SGC-7901生長的影響并探求其可能機(jī)制
  方法:
  1.MTT法檢測(cè)兩種藥物分別處理后不同氧化水平對(duì)胃

2、癌細(xì)胞SGC-7901的增殖影響,計(jì)算出半數(shù)抑制濃度IC50,確定等效曲線;
  2.流式細(xì)胞檢測(cè)雙藥處理后細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)濃度的變化;
  3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)不同濃度雙藥處理后Nrf2、和下游抗氧化HO-1和NQO1基因的表達(dá)。
  結(jié)果:
  1.PMTG在體外能明顯抑制人胃癌SGC7901細(xì)胞增殖,且呈濃度梯度依賴性(P<0.01),IC50=2

3、21μg/L; HP在體外能明顯抑制人胃癌細(xì)胞增殖,呈濃度梯度依賴性(P<0.01),IC50=52μ mol/L。
  2.流式細(xì)胞DCF法可檢測(cè)到細(xì)胞內(nèi)ROS改變, SGC細(xì)胞內(nèi)ROS濃度與PMTG處理濃度呈負(fù)相關(guān),與HP處理濃度呈正相關(guān)。
  3.rt-PCR法檢測(cè)凋亡相關(guān)下游基因HO-1及NQO1基因表達(dá)的情況,PMTG處理組相關(guān)基因的表達(dá)均明顯高于陰性對(duì)照組(P<0.01); PMTG可上調(diào)HO-1基因表達(dá),上調(diào)N

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