1、前言：
　　喉癌是頭頸部常見惡性腫瘤之一，其局部浸潤轉移能力及有無淋巴結轉移對患者的預后產(chǎn)生重要影響。腫瘤的轉移是個多因素參與的多階段的復雜過程。
　　Epithelial-to-mesenchymal transition(EMT)是上皮細胞呈現(xiàn)間質細胞的形態(tài)。上皮細胞形成EMT主要標志有如:上皮標志物E-cadherin表達的降低以及間質標志物vimentin、snail及N-cadherin表達的升高。在典型的EMT的

2、模型中，細胞與細胞之間失去極性，呈現(xiàn)出典型的形態(tài)學改變。形成EMT的細胞表現(xiàn)出更強侵襲能力。越來越多的證據(jù)證明EMT與多種生長因子有關，如轉移生長因子(TGF-β1)，表皮生長因子(EGF)等。但是，EMT形成的機制到目前為止還不是非常明確;金雀異黃素（又稱染料木素，Genistein）是從大豆中提取的一種黃酮類有效成分，研究表明，Genistein在包括乳腺癌、結腸癌、膀胱癌、肺癌及前列腺癌等多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展階段存在著多重抑制效應

3、;曲古菌素A(Trichostatin A，TSA)是鏈霉素代謝產(chǎn)物，也是第一個來源于天然產(chǎn)物的組蛋白去乙酰化酶抑制劑(histonedeacetylase inhibitor，HDACi)，可特異性抑制哺乳動物組蛋白去乙?；福菇M蛋白高乙?；?、激活基因表達、抑制細胞增殖、引起細胞分化或凋亡。
　　目的：
　　觀察Genistein聯(lián)合TSA對于人喉癌細胞株Hep-2 EMT的影響。
　　方法：
　　HEp2細

4、胞用含10％FBS的RPMI1640培養(yǎng)，同時在培養(yǎng)基中加入EGF(100ng/ml)以及TGF-β1(10ng/ml)，我們同時轉染pGEX-ATF2的人喉癌細胞系HEp2;倒置顯微鏡下分別觀察24、48 h后細胞形態(tài)學的動態(tài)變化。應用TSA聯(lián)合Genistein誘導HEp2細胞凋亡，如上細胞均經(jīng)Western blot、RT-PCR、transwell侵襲實驗檢測。
　　結果：
　　我們證明了TGF-β1聯(lián)合EGF共同誘

5、導可使HEp2細胞產(chǎn)生EMT，同時，高表達ATF2的HEp2亦可以產(chǎn)生EMT。TSA與Genistein均可以對人喉癌細胞HEp2產(chǎn)生抑制作用，而小劑量的Genistein與TSA(25μM∶50nM)就可以協(xié)同作用于HEp2細胞，明顯促進細胞的凋亡，部分抑制由EGF誘導的人喉癌細胞HEp2產(chǎn)生的EMT。
　　結論：
　　我們證明了TGF-β1聯(lián)合EGF共同誘導可使HEp2細胞產(chǎn)生EMT，同時，高表達ATF2的HEp2亦可以