1、研究背景:
　　宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其死亡率占女性腫瘤的第二位。盡管早期手術(shù)療效顯著，但宮頸癌容易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是患者死亡的主要原因。順鉑是宮頸癌復(fù)發(fā)的首選化療藥物，但其效率不高。因此，探索宮頸癌的發(fā)病、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和化療耐藥機(jī)制是迫切需要解決的問(wèn)題。宮頸癌的發(fā)生發(fā)展與人類(lèi)乳頭瘤病毒(HPV)感染密切相關(guān)，并涉及到PI3K/AKT/mTOR通路的激活。但由于其腫瘤異質(zhì)性，可能還涉及到多種腫瘤標(biāo)記物和信號(hào)通路。URI是前

2、折疊素家族非傳統(tǒng)成員，是mTOR信號(hào)通路的一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子。研究表明URI與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。我們前期的研究表明在癌前病變CIN和浸潤(rùn)性宮頸癌中URI表達(dá)上調(diào)。值得關(guān)注的是URI和HPV均與mTOR通路的激活有關(guān)，但兩者的內(nèi)在聯(lián)系，以及與宮頸癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián)性和潛在機(jī)制尚缺乏系統(tǒng)的研究。
　　研究目的:
　　通過(guò)干預(yù)人HPV陽(yáng)性和陰性宮頸癌細(xì)胞系URI的表達(dá)，研究URI對(duì)宮頸癌細(xì)胞順鉑耐藥性和腫瘤細(xì)胞遷移/侵襲能力的影響及

3、機(jī)制，為URI的癌基因特性提供新的依據(jù)。
　　研究方法:
　　(1)應(yīng)用基因轉(zhuǎn)染和siRNA沉默技術(shù)在人HPV陽(yáng)性(CaSki)和陰性(C33A)宮頸癌細(xì)胞株中過(guò)表達(dá)或敲低URI，并采用RT-PCR、qRT-PCR以及Western blot等多種方法檢測(cè)其表達(dá)水平。
　　(2)用CCK-8試劑盒分別檢測(cè)上述URI干預(yù)表達(dá)的細(xì)胞的活力。
　　(3)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)URI干預(yù)后宮頸癌細(xì)胞的凋亡以及順鉑處理?xiàng)l件下細(xì)胞的

4、增殖與凋亡。
　　(4)劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)URI干預(yù)后宮頸癌的遷移/侵襲能力，qRT-PCR檢測(cè)EMT相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)。
　　研究結(jié)果:
　　(1)URI siRNA干擾后宮頸癌細(xì)胞中URI表達(dá)水平降低，而pCMV6-URI質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染可致URI表達(dá)增高，表明URI在宮頸癌細(xì)胞中干預(yù)成功。
　　(2)在C33A和CaSki中，過(guò)表達(dá)URI可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，而敲低細(xì)胞URI表達(dá)抑制細(xì)胞增殖。<

5、br>　　(3)URI的過(guò)表達(dá)增加了細(xì)胞對(duì)順鉑的抵抗，而URI的干擾可促進(jìn)順鉑作用下的細(xì)胞凋亡。
　　(4)URI通過(guò)上調(diào)EMT標(biāo)志物Vimentin，促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞遷移/侵襲。
　　研究結(jié)論:
　　URI促進(jìn)人HPV陽(yáng)性和陰性宮頸癌細(xì)胞的增殖，并增加宮頸癌細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性，URI還可能通過(guò)上調(diào)Vimentin，促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)，增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞遷移/侵襲的能力，從而在宮頸癌的轉(zhuǎn)移中起作用。在兩株細(xì)胞中，U