1、目的：研究異基因造血干細(xì)胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT）前后外周血NK細(xì)胞1-磷酸鞘氨醇受體5（sphingosine-1-phosphate receptor 5，S1PR5）表達(dá)的變化，探討S1PR5表達(dá)量變化與急性移植物抗宿主病（acute graft-versus-host disease，aGVHD）發(fā)生的關(guān)系。
　　 方

2、法：（1）密度梯度離心法分離17例動(dòng)員前供者及相應(yīng)移植后1個(gè)月患者外周血單個(gè)核細(xì)胞；（2）采用miniMACS磁珠分選系統(tǒng)分離純化allo-HSCT供者及移植后1個(gè)月患者外周血NK細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分選后CD56+CD3NK細(xì)胞純度：（3）微量RNA提取試劑盒提取NK細(xì)胞總RNA；（4）采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將NK細(xì)胞RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA；（5）通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)allo-HSCT供者及移植后1個(gè)月患者外周血NK細(xì)胞S1PR5mR

3、NA表達(dá)變化，并觀察這種變化與患者發(fā)生aGVHD的關(guān)系。
　　 結(jié)果：（1）通過(guò)miniMACS磁珠分選系統(tǒng)獲得17例allo-HSCT供者及患者外周血高純度NK細(xì)胞；（2）17例患者中有10例移植后1個(gè)月外周血NK細(xì)胞S1PR5 mRNA表達(dá)較相應(yīng)供者降低，7例升高；總體上看，移植前后S1PR5表達(dá)變化存在較大的個(gè)體差別，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；（3）9例發(fā)生aGVHD的患者中，有7例移植后1個(gè)月外周血NK細(xì)胞S1PR5 mRNA水