胚胎干細(xì)胞在內(nèi)膜損傷小鼠宮腔內(nèi)移植的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、背景:子宮內(nèi)膜損傷是婦產(chǎn)科醫(yī)生臨床上經(jīng)常遇到的問(wèn)題,其治療策略最重要的一點(diǎn)是促進(jìn)子宮內(nèi)膜再生和功能恢復(fù),而對(duì)于局部重度或廣泛的內(nèi)膜損傷,目前的治療方法尚難以解決子宮內(nèi)膜重新再生問(wèn)題,是臨床治療上的棘手問(wèn)題。隨著近年來(lái)干細(xì)胞分化理論深入研究,干細(xì)胞應(yīng)用于臨床治療的研究也越來(lái)越多,這為子宮內(nèi)膜損傷治療提供了一種新的理念,由于胚胎干細(xì)胞(Embryonic stemcells,ESC)有很高的再生和分化潛能,胚胎干細(xì)胞于其內(nèi)膜損傷內(nèi)移植,為干

2、進(jìn)一步研究細(xì)胞治療子宮內(nèi)膜損傷奠定基礎(chǔ)。
   目的:研究小鼠胚胎干細(xì)胞移植入內(nèi)膜損傷小鼠宮腔內(nèi)后的存活與遷徙情況。
   方法:利用MEF作為飼養(yǎng)層培養(yǎng)EGFP+ES細(xì)胞,于ICR小鼠腎被膜下移植,4周后對(duì)移植后腫物HE染色及nestin、α-SMA和AFP免疫組化染色觀察;用熱損傷處理子宮內(nèi)膜方法制備ICR小鼠子宮內(nèi)膜損傷模型,并進(jìn)行一系列的時(shí)間觀察損傷后子宮內(nèi)膜情況;急性損傷后移植一定量(3-4×105個(gè))未分化的

3、GFP+小鼠胚胎干細(xì)胞至內(nèi)膜損傷小鼠宮腔內(nèi),14天后取子宮,直接熒光顯微鏡觀察和HE染色后及抗GFP蛋白抗體免疫組化染色后顯微鏡下觀察小鼠胚胎干細(xì)胞的存活和遷徙情況。
   結(jié)果:ES細(xì)胞在成纖維飼養(yǎng)層細(xì)胞上生長(zhǎng)良好,呈克隆狀生長(zhǎng),熒光顯微鏡下觀察ESC有明顯EGFP表達(dá),發(fā)出綠色熒光,腎被膜下移植后有三個(gè)胚層標(biāo)記表達(dá)(nestin、α-SMA和AFP)的畸胎瘤形成;子宮內(nèi)膜熱損傷處理后至14d天HE染色觀察子宮內(nèi)膜沒(méi)有修復(fù)表現(xiàn)

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