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文檔簡介
1、該論文分為兩部分。
第一章Snail蛋白在肝細胞癌中的表達與臨床意義
目的:通過對Snail在肝癌中表達的研究來探索Snail與肝癌浸潤和轉移及預后的關系。
方法:選取湘雅醫(yī)院2010年1月-2011年12月150例手術切除肝癌標本及80例正常肝臟組織標本,采用免疫組化SP法研究Snail在150例肝癌標本及80例正常肝臟組織標本表達情況。
結果:Snail在肝癌中陽性表達率為89
2、.37%,高于正常組織3.75%,兩者間表達均具有顯著差異性(P<0.05)。Snail表達與肝癌的腫塊大小、TNM分期、腫瘤分化程度、門脈癌栓、術后復發(fā)呈正相關(P<0.05),與年齡、性別、AFP水平、Child分級無相關性.Snail陽性患者生存期明顯短于陰性患者。
結論: Snail間接地表達了肝癌的惡性程度,與肝癌的發(fā)生、發(fā)展及轉移有一定的關系,可作為肝癌惡性程度及肝癌患者預后的評估指標。
第二章R
3、NAi抑制Snail基因表達的作用
目的:用RNA干擾(RNAinterference,RNAi)技術抑制轉錄因子Snail表達,觀察人肝癌HepG2細胞上皮-間質轉分化型和體外侵襲能力的影響。
方法:構建能表達針對Snail的小干擾RNA(Smallinterfering RNA,siRNA)的RNA干擾載體(Snail siRNA vector)和表達不針對任何已知mRNA的siRNA的陰性對照RNA干擾
4、載體(control siRNA vector),分別轉染HepG2細胞,篩選得到Snail表達受抑制的HepG2-siSnail細胞和 Snail表達未受影響的HepG2-siControl細胞。別采用RT-PCR和Western blot術檢測非轉染組、HepG2-siSnail、HepG2-siControl三組細胞Snail、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和E-cadherin表達,用Boyden chamber模型檢測細胞侵
5、襲能力。
結果: HepG2-siSnail組與HepG2-nontransfection組相比,Snail和α-SMA表達顯著減弱(p<0.01),E-cadherin表達顯著增強(p<0.01),Boyden chamber穿膜細胞數(shù)顯著減少(p<0.01);HepG2-siControl組Snail、α-SMA和E-cadherin表達及Boyden chamber穿膜細胞數(shù)和HepG2-nontransfectio
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