1、本文分析了干擾Snail基因表達對子宮內(nèi)膜癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響。本研究分為兩個部分：
　　第一部分：Snail蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達與臨床意義。
　　目的：通過對Snail在子宮內(nèi)膜癌中表達的研究來探索Snail與子宮內(nèi)膜癌浸潤和轉(zhuǎn)移及預后的關系。
　　方法：采用免疫組織化學方法，結(jié)合組織芯片技術，檢測124例子宮內(nèi)膜癌、28例不典型增生內(nèi)膜、35例正常內(nèi)膜組織中Snail的表達水平，分析Snail蛋白表達與臨床病理因素

2、的關系。
　　結(jié)果：子宮內(nèi)膜癌組織中Snail的表達率為46.8％，與不典型增生內(nèi)膜和正常內(nèi)膜組織相比，有顯著統(tǒng)計學差異(P<0.01)。Snail表達與FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(P<0.05)。Snail陽性患者生存期明顯短于陰性患者。
　　結(jié)論：Snail可能通過調(diào)控HIF-1α和E-cadherin的表達，在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生及侵襲轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用，針對干預Snail途徑的方案可能對于子宮內(nèi)膜癌的診治提供新

3、的方法。
　　第二部分：shRNA抑制Snail基因表達的作用。
　　目的：通過shRNA抑制轉(zhuǎn)錄因子Snail的表達，觀察人子宮內(nèi)膜癌ISK細胞在體外侵襲轉(zhuǎn)移能力以及和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關系。
　　方法：構(gòu)建表達Snail的短發(fā)夾RNA(Small hairpin-shaped RNA, shRNA)的RNA干擾載體(Snail shRNA vector)和表達不針對任何已知mRNA的shRNA陰性對照RNA干擾載體(

4、control shRNA vector)，分別轉(zhuǎn)染ISK細胞后篩選得到Snail表達受抑制的ISK-shSnail細胞和 Snail表達未受影響的ISK-shControl細胞。分別采用 RT-PCR和 Western blot技術在mRNA和蛋白水平驗證各組細胞。用CCK-8檢測各組細胞的增殖能力。用Transwell小室模型結(jié)合基質(zhì)膠的方法比較各組細胞在遷移能力和侵襲能力的差異。
　　結(jié)果：Snail-shRNA組與 ISK

5、未轉(zhuǎn)染組相比,Snail表達明顯減弱(P<0.01), Transwell chamber穿膜細胞數(shù)顯著減少(P<0.01); ISK-shControl組 Snail表達及Transwell chamber穿膜細胞數(shù)和ISK未轉(zhuǎn)染組相比無顯著差異(P>0.05)。CCK-8法檢測細胞生長，Snail干擾后ISK細胞生長明顯減慢,與未轉(zhuǎn)染組相比有顯著差異。
　　結(jié)論：通過RNA干擾沉默Snail基因的表達能有效地抑制子宮內(nèi)膜癌IS