1、基礎(chǔ)研究表明,VM-26對(duì)細(xì)胞DNA的破壞作用是VP-16的6-10倍,在淋巴瘤,腦瘤,肺癌等治療上有很好的療效.但VM-26在胃癌上的應(yīng)用甚少,值得進(jìn)一步的研究探討.尤其是VM-26聯(lián)合用藥對(duì)胃癌細(xì)胞作用的基礎(chǔ)研究,國內(nèi)外文獻(xiàn)未見報(bào)道.該實(shí)驗(yàn)擬多種實(shí)驗(yàn)方法,觀察以VM-26為主的聯(lián)合用藥對(duì)胃癌細(xì)胞的體外抗瘤活性和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的能力,觀察聯(lián)合用藥價(jià)值,初步探討其作用機(jī)制,期望為開發(fā)高效安全的臨床化療方案提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù).材料與方法:(

2、1)細(xì)胞選用人胃腺癌細(xì)胞株BGC-823;(2)實(shí)驗(yàn)藥物選用VM-26以及常用的化療藥物順鉑(cis-dismine dichoroplatinum,DDP),5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),紫杉醇(paclitaxel,TAX),羥基喜樹堿(Hydroxycamptothecin,HCPT),VP-16等;(3)MTT比色法測定單藥及聯(lián)合用藥的不同濃度處理后細(xì)胞的生長抑制率,(4)并選用較小的濃度組用流式細(xì)胞儀

3、檢測細(xì)胞的周期分布和凋亡率的變化.(5)免疫組化測定凋亡相關(guān)基因p53,Survivin的蛋白表達(dá)的影響.(6)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,計(jì)量資料,采用正態(tài)性檢驗(yàn),方差齊性檢驗(yàn)均數(shù)間的兩兩比較采用LSD方法;率的比較采用X2檢驗(yàn),單樣本t檢驗(yàn),以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn).結(jié)論:(1)VM-26可抑制胃腺癌細(xì)胞BGC-823的生長,這種抑制作用在一定濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴性.與同類藥物VP-16相比,在相同摩爾濃度下,作用強(qiáng)于

4、VP-16.VM-26可誘導(dǎo)BGC-823細(xì)胞凋亡,有強(qiáng)大G<,2>/M細(xì)胞阻斷作用.(2)VM-26可上調(diào)凋亡相關(guān)基因P53的蛋白表達(dá),可下調(diào)凋亡抑制基因Survivin蛋白的表達(dá).調(diào)控細(xì)胞基因的表達(dá)是VM-26誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一.(3)VM-26分別與TAX,DDP,5-FU,HCPT聯(lián)合,都可抑制細(xì)胞的生長,抑制作用較單藥時(shí)增加.聯(lián)合作用時(shí)藥物劑量較單藥時(shí)減少.誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的能力增強(qiáng),細(xì)胞的周期分布與單藥作用時(shí)不同.(4)誘導(dǎo)