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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
建立大鼠肝硬化模型,復(fù)制保留半肝動(dòng)脈血供的入肝血流阻斷法、Pringle法和半肝血流阻斷法,制備肝硬化肝臟缺血再灌注損傷模型,通過比較肝臟病理學(xué)改變、血清ALT/AST水平、肝組織中NF-κBp65及血清中TNF-α的表達(dá),重點(diǎn)探討保留半肝動(dòng)脈血供的入肝血流阻斷法對(duì)肝硬化肝臟缺血再灌注損傷的影響。
方法:
將122只250g-300gwistar。雄性大鼠用四氯化碳+酒精誘導(dǎo)建立肝硬化模
2、型。將96只肝硬化wistar雄性大鼠隨機(jī)分為:Pringle法組(PR組,n=32)、半肝阻斷組(HH組,n=32)和保留半肝動(dòng)脈血供的入肝血流阻斷組(WH組,n=32)。每組又分為4個(gè)亞組,分別為再灌注后1h、3h、6h、24h,每亞組為8只。采用上述三種方法阻斷大鼠肝血流15min后,去血管夾恢復(fù)血流。分別于再灌注后1h、3h、6h、24h取材。觀察肝臟病理學(xué)改變,應(yīng)用賴氏法檢測(cè)血清中ALT、AST水平,ELISA法檢測(cè)血清中TN
3、F-α的表達(dá)水平,WesternBlot法檢測(cè)肝組織中NF-κBp65的表達(dá)水平。統(tǒng)計(jì)資料表達(dá)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示,數(shù)據(jù)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,采用單因素方差分析比較各組間差異;方差齊性時(shí)各組之間多重比較采用S-N-K檢驗(yàn);方差不齊時(shí)各組之間多重比較采用DunnettT3檢驗(yàn)。以上檢驗(yàn)以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1.誘導(dǎo)12周后成功建立大鼠肝硬化模型106只,成模率86
4、.9%。
2.共對(duì)99只肝硬化大鼠進(jìn)行了手術(shù),成功建立肝缺血再灌注模型96只。每組成功完成32只,手術(shù)成功率分別為PR組94.1%(32/34)、HH組97%(32/33)、WH組100%(32/32)。
3.再灌注后各時(shí)點(diǎn)肝臟病理學(xué)檢查顯示PR組的損傷程度均重于WH組和HH組,而WH組的損傷程度近同于HH組。再灌注后各時(shí)點(diǎn)PR組ALT、AST的改變、TNF-α的表達(dá)均高于wH組和HH組(P<0.05),而w
5、H組與HH組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組NF-κBp65表達(dá)水平均在再灌注6h達(dá)到高峰,在再灌注6h時(shí)比較三組NF-κBp65表達(dá)水平,WH組、HH組均明顯低于PR組(P<0.05);WH組與HH組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:
1.對(duì)于肝硬化大鼠,保留半肝動(dòng)脈血供的入肝血流阻斷法在減輕肝臟缺血再灌注損傷方面近同于半肝血流阻斷法,優(yōu)于Pringle法。
2.保留半肝動(dòng)脈血供的入肝血流阻斷法,保證了健側(cè)
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