三種園林樹種再生體系的建立及抗寒基因轉化方法的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文以常見的園林樹種女貞、泡桐和香樟為研究對象,研究了每一樹種的不同激素濃度配比對其愈傷組織、芽和根誘導的影響。優(yōu)化了三種常見園林樹種的再生條件,獲得了高效再生體系。再生結果表明,樹種泡桐和香樟的再生能力明顯高于樹種女貞,并篩選出三種樹種誘導愈傷組織、芽和根的最佳培養(yǎng)基。 文章以女貞的種子、帶腋芽的莖段為外植體,誘導植株再生,建立高效植株再生體系,并為下一階段的轉基因工作做準備。實驗獲得胚萌發(fā)、誘導莖段分化生長、愈傷組織、芽和根

2、的最佳培養(yǎng)基。以6-BA(0.5mg/l)+NAA(0.1mg/l)+GA(0.1mg/l)MS培養(yǎng)基,胚萌發(fā)的速度最高,6-BA2.0+NAA0.02的MS培養(yǎng)基莖段分化生長效果最佳;以北方抗寒香樟為試材,建立無菌外植體,篩選出側芽分化最佳培養(yǎng)基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,繼代最佳培養(yǎng)基為MS+5.0mg/LBA+1.0mg/LIBA,同時進行了葉片再生分化試驗研究。 通過正交試驗,從9個不同濃度的NA

3、A、BA和IBA組合的MS培養(yǎng)基中,找出了泡桐葉片、莖段及莖段愈傷組織誘導芽分化最適培養(yǎng)基分別為MS+6-BA(2mg/L)+NAA(0.2mg/L)+IBA(0.1mg/L),MS+6-BA(1mg/L)+IBA(0.1mg/L),MS+6-BA(1mg/L)+NAA(0.1mg/L)+IBA(0.05mg/L)。在建立起三種常見園林樹種再生體系的基礎上,主要先對女貞進行了抗寒基因的遺傳轉化,利用三種轉基因方式,農桿菌介導的遺傳轉化法

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