1、甲狀腺癌（thyroid cancer）分為分化型和未分化型兩大類。對(duì)于分化型甲狀腺癌（differentiated tyroid cancer,DTC），術(shù)后放射性碘治療過(guò)程中腫瘤細(xì)胞逐漸地失去攝碘能力，發(fā)生失分化現(xiàn)象，如何使癌細(xì)胞再分化是研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)；對(duì)于未分化型甲狀腺癌（anaplastic thyroid cancer,ATC），如何使未分化的癌細(xì)胞發(fā)生分化以便用放射性碘治療和如何減慢腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力，是目前面臨的一大難題

2、。
　　通過(guò)閱讀大量文獻(xiàn)，我們得出REGγ基因與甲狀腺癌的惡性程度相關(guān)，進(jìn)而推測(cè)其可能與甲狀腺癌的分化和轉(zhuǎn)移相關(guān)。本研究通過(guò)沉默甲狀腺癌細(xì)胞株（ARO、WRO）中的 REGγ基因，觀察分化相關(guān)基因（鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體、甲狀腺特異轉(zhuǎn)錄因子-1、甲狀腺激素受體、配對(duì)盒基因-8) mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的變化情況，及新鮮甲狀腺癌標(biāo)本中REGγ和細(xì)胞中E-cadherin的表達(dá)情況，由此初步提出REGγ對(duì)甲狀腺癌分化程度和轉(zhuǎn)移的影響，并通過(guò)Real

3、-time PCR測(cè)定相關(guān)基因mRNA的表達(dá)，進(jìn)行了REGγ發(fā)揮作用的相關(guān)信號(hào)通路的初步研究。
　　第一部分REGγ與甲狀腺癌細(xì)胞的分化程度相關(guān)
　　目的：檢測(cè)甲狀腺癌細(xì)胞株（ARO和WRO）沉默REGγ后是否出現(xiàn)分化相關(guān)基因表達(dá)增高的現(xiàn)象，即出現(xiàn)再分化現(xiàn)象。
　　本文通過(guò)體外培養(yǎng)沉默REGγ前后的甲狀腺癌ARO及WRO細(xì)胞株，測(cè)定甲狀腺細(xì)胞分化相關(guān)基因(NIS、TSHR、TTF-1、Pax-8)mRNA和蛋白質(zhì)水平的

4、變化，初步探討REGγ對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞分化程度的影響。
　　方法：培養(yǎng)的AROshN、AROshR、WROshN及 WROshR細(xì)胞株，利用實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time PCR）和蛋白印跡（Western-blot）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)上述基因mRNA和蛋白水平的變化。
　　結(jié)果：兩細(xì)胞株中，沉默REGγ組與未沉默組相比，NIS、TSHR、TTF-1、Pax-8 mRNA表達(dá)均增高。在WRO細(xì)胞中，TSHR和Pax-8的增高差

5、異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；ARO細(xì)胞中，NIS和TTF-1的增高差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。同時(shí)NIS蛋白表達(dá)水平也增高。
　　結(jié)論：沉默REGγ后，ARO、WRO細(xì)胞中NIS、TSHR、TTF-1、Pax-8 mRNA和NIS蛋白水平上升，推測(cè)沉默REGγ后可以使甲狀腺癌細(xì)胞出現(xiàn)再分化。
　　第二部分REGγ在乳頭狀甲狀腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義
　　目的：本文旨在探討REGγ在乳頭狀甲狀腺癌組織中的

6、表達(dá)及其與各臨床因素的相關(guān)性。
　　方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)REGγ在乳頭狀甲狀腺癌組織中的表達(dá)及Realtime-PCR方法檢測(cè)REGγ在甲狀腺乳頭狀癌和癌灶旁組織中的表達(dá)，分析REGγ與臨床因素的相關(guān)性及其在癌灶與癌灶旁組織中的表達(dá)差異。
　　結(jié)果： REGγ蛋白在乳頭狀甲狀腺癌組織中表達(dá)明顯增高，且其陽(yáng)性率為75.9％(41/54)，REGγ表達(dá)與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)（P=0.023、0.001＜0.05

7、）。REGγ mRNA在癌灶旁組織比癌灶中表達(dá)增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.006＜0.05）。
　　結(jié)論： REGγ的陽(yáng)性表達(dá)可作為乳頭狀甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)，可為臨床診斷、治療及判斷預(yù)后提供參考。
　　第三部分REGγ發(fā)揮作用的相關(guān)信號(hào)通路的初步研究
　　目的：本文旨在初步探討REGγ在ARO和WRO細(xì)胞株中發(fā)揮作用的相關(guān)信號(hào)通路。
　　方法：應(yīng)用Realtime-PCR方法篩選常見信號(hào)通路

8、如：Shh、Wnt和Notch信號(hào)通路相關(guān)基因Shh、Ptch、smo、Wnt、GSK-3β、β-catenin和Notch1在沉默REGγ前后的ARO和WRO細(xì)胞株中的表達(dá)，初步探討REGγ在ARO和WRO細(xì)胞株中發(fā)揮作用的信號(hào)通路。
　　結(jié)果：在ARO細(xì)胞中，沉默REGγ后，Shh信號(hào)通路的mRNA表達(dá)均降低，Shh表達(dá)降低差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。Wnt信號(hào)通路Wnt mRNA表達(dá)降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.

9、05）；GSK-3β和β-catenin的mRNA表達(dá)量增高，GSK-3β的表達(dá)增高差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Notch信號(hào)通路Notch1 mRNA表達(dá)量增加，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在WRO細(xì)胞中，沉默REGγ后，Shh信號(hào)通路和Wnt信號(hào)通路基因表達(dá)均增高，Notch信號(hào)通路中Notch1 mRNA表達(dá)量增加，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.061＞0.05）。
　　結(jié)論：在ARO細(xì)胞株中，REGγ可能通過(guò)Shh、Wnt和No