1、糖胺聚糖主要存在細胞外基質和細胞膜,是重要的生物大分子,在很多腫瘤組織中,均發(fā)現(xiàn)糖胺聚糖的含量、組成、分子大小及分子結構與相應的正常組織有明顯差異,其中有些差異對腫瘤預后有明顯影響。但在同一腫瘤的不同組織學類型以及同一組織學類型腫瘤細胞的不同分化程度之間,糖胺聚糖的差異是否依然存在目前尚知之甚少。因此,本論文的目的在于探討肝癌組織的不同組織學類型之間,以及肝細胞癌的不同分化程度之間糖胺聚糖的含量、組成、相對分子量及二糖組成的差異。本論文

2、第一章建立了從少量肝組織中微量分離純化糖胺聚糖的方法。采用胰蛋白酶及中性蛋白酶兩步酶解法提取糖胺聚糖,采用透析、陽離子交換法、凝膠過濾法及陰離子交換法純化,成功地從1克新鮮豬肝組織中分離純化得到100～200微克硫酸乙酰肝素,所得的制品經薄層色譜檢查不含蛋白質,經醋酸纖維素薄膜電泳法檢查不含其它糖胺聚糖成分,表明該法可用于少量組織中微量糖胺聚糖的分離和純化中。本論文第二章建立了糖胺聚糖的微量結構分析方法。分別比較了化學降解法及酶解法降解

3、糖胺聚糖效果的差異,并對酶解法得到的不同二糖采用高效液相離子色譜法進行分離,并比較了2-氨基苯甲酰胺熒光標記法標記前后檢出限量的差別,將糖胺聚糖二糖分析方法的靈敏度提高到100pg以下。并對經分離純化得到的豬肝組織硫酸乙酰肝素的二糖組成進行分析,發(fā)現(xiàn)與豬內腸組織硫酸乙酰肝素有明顯差異,證明了二糖組成分析是比較不同來源糖胺聚糖細微結構差異的良好方法。本論文第三章采用組織學方法,以Edmondson組織病理學診斷標準,對肝癌組織進行了病理學

4、診斷,并將肝癌組織分為肝內膽管癌、高分化肝細胞癌、中分化肝細胞癌及低分化肝細胞癌四組,為從事不同肝癌組織中糖胺聚糖的結構差異比較提供了前提。本論文第四章采用已建立的分離純化及結構分析的方法對不同肝癌組織中糖胺聚糖的差異進行了比較。研究發(fā)現(xiàn),肝內膽管癌中透明質酸水平顯著增高,而肝細胞癌中透明質酸僅輕度增高。隨著肝細胞癌中腫瘤細胞分化程度的降低,硫酸軟骨素含量及相對比例均逐步增高,而硫酸乙酰肝素相對比例逐步降低,且低分子量糖胺聚糖比例也增高