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![GBSSI與glgC融合基因馬鈴薯轉化載體的構建.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/e2e7d660-6c5a-4555-81fc-63257fedca47/e2e7d660-6c5a-4555-81fc-63257fedca471.gif)
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文檔簡介
1、增加塊莖淀粉含量,改良淀粉品質是提高馬鈴薯工業(yè)淀粉利用效率、拓寬其應用領域的前提。隨著對淀粉生物合成代謝途徑分子生物學機理研究的深入,運用基因工程途徑調控淀粉生物合成中相關酶的活性增加淀粉含量,改良淀粉品質成為可能。 研究業(yè)已表明,在植物中,與淀粉粒結合的淀粉合成酶(GBSSI)是唯一決定貯藏器官中直鏈淀粉合成的酶,催化淀粉生物合成底物(ADP-葡萄糖)形成的腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)是淀粉生物合成的限速酶,其活
2、性受晝夜周期變化的調控;大腸桿菌編碼AGPase的glgC基因馬鈴薯體內表達可提高其塊莖淀粉含量達60﹪。為了提高塊莖內淀粉含量和獲得糯性淀粉塊莖,本研究擬用大腸桿菌glgC編碼的AGPase替代馬鈴薯內源AGPase,提高和穩(wěn)定AGPase活性,以期增加塊莖淀粉含量;同時用反義cDNA結構抑制GBSSI活性,達到抑制直鏈淀粉合成,獲得糯性淀粉塊莖的目的。為此,本論文通過PCR和RT-PCR等方法,獲得了大腸桿菌glgC基因,馬鈴薯GB
3、SSIcDNA和塊莖特異性表達的GBSSI啟動子,并分別構建了由GBSSI、CaMV35S啟動子驅動的glgC和反義GBSSIcDNA五個植物轉化載體,它們分別包含以下融合基因:①GBSSI啟動子與GUS融合基因,旨在為塊莖生物反應器目的載體的構建提供基本框架。②CaMV35S和GBSSI啟動子分別驅動glgC的融合基因,旨在比較兩個啟動子在驅動glgC表達、增加塊莖淀粉合成的區(qū)別;③GBSSI啟動子驅動GBSSIcDNA反義結構、GB
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