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文檔簡介
1、水稻(Oryza sativa L.)是我國乃至世界上的主要糧食作物。在我國,其栽培總面積、總產量和單位面積產量均居各類糧食作物的首位。每年,全國由于雜草危害直接造成的水稻產量損失達一千萬噸以上。然而,防除稻田雜草需要投入大量人力、物力和財力,還噴灑大量除草劑,對環(huán)境造成嚴重污染。 轉基因技術的產生和發(fā)展,使我們創(chuàng)造突破性的種質資源成為可能。利用植物基因工程培育抗除草劑優(yōu)質高產水稻品種,將經濟有效的控制稻田雜草,從而推動我國糧食
2、生產。 aroA基因所編碼的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)提供對除草劑草甘膦的抗性;并且aroA基因所對應的除草劑為高效、低毒、在生物體和土壤中無殘留、環(huán)保型的除草劑。 本研究,將抗除草劑草甘膦的基因aroA構建在植物表達載體上,并通過農桿菌介導法轉入水稻不同品種中,獲得了抗除草劑的轉基因植株,同時對水稻轉基因過程中的一些問題作了初步探討。 其主要研究結果如下: 1.利用載體pCambi
3、a1301和除草劑草甘膦抗性基因基因aroA,構建了一個去除了潮霉素抗性基因hpt的植物表達載體pCambia1301-aroA。 2.利用構建的載體,通過根癌農桿菌介導法將aroA基因轉入水稻品種,最終共得到16株再生植株。其中其中中花15得到4株,蜀恢527得到12株。 3.對16株水稻再生植株進行PCR檢測,有9株顯示為陽性。其中,蜀恢527有8株,中花15有1株。將PCR檢測為陽性的植株,進行田間除草劑抗性檢測,
4、結果有2株表現出了除草劑抗性。這一結果說明目的基因不僅整合到水稻基因組中,而且得以充分表達,使水稻植株產生了除草劑抗性。 4.對4個材料的成熟胚和幼胚進行愈傷組織的誘導,實驗結果表明:不同基因型的水稻出愈率有所不同,其中粳稻出愈率比秈稻高;同一基因的不同材料之間的出愈率也不相同。幼胚誘導出的愈傷質量較好,生長迅速,但是操作較麻煩,而且幼胚的污染率高于成熟胚。 5.將不同受體材料的愈傷組織分別接種到含不同濃度草甘膦的培養(yǎng)基
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