1、在骨關(guān)節(jié)炎病程中，典型的病理變化發(fā)生在關(guān)節(jié)軟骨層中。病程初始為細(xì)胞外基質(zhì)蛋白聚多糖的喪失和膠原纖維網(wǎng)架的紊亂，接著是細(xì)胞變性和凋亡。最初小的局灶病變，逐漸增加周長(zhǎng)和深度，最終波及到整個(gè)關(guān)節(jié)軟骨。雖然殘留的軟骨細(xì)胞代謝活性增加，但損傷進(jìn)程明顯超過(guò)了合成作用。 已進(jìn)行大量的基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)試圖加快關(guān)節(jié)軟骨的組織愈合和成熟關(guān)節(jié)軟骨微損傷的結(jié)構(gòu)和功能的重建。這些病變通常是在許多關(guān)節(jié)疾病如骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis，OA)過(guò)

2、程中產(chǎn)生的，還有大量的基因和代謝疾病，如肢端肥大癥、Paget's病、Stickler綜合征、血友病和創(chuàng)傷引起的后果。關(guān)節(jié)軟骨病變通常不能自身修復(fù)，在特定生物條件下僅能部分修復(fù)。關(guān)節(jié)軟骨病變通常引起關(guān)節(jié)疼痛、僵硬和關(guān)節(jié)功能下降或紊亂和殘疾。這些病變一般認(rèn)為進(jìn)一步可導(dǎo)致OA。為此人們?cè)噲D修復(fù)軟骨病變，包括對(duì)癥治療，這可減輕病人疼痛或可保留關(guān)節(jié)功能和預(yù)防或至少明顯減低導(dǎo)致關(guān)節(jié)障礙的病變進(jìn)程?；诖吮菊n題分三部分來(lái)對(duì)軟骨缺損的修復(fù)以及出血對(duì)軟

3、骨的影響進(jìn)行研究。 1多聚糖生物材料修復(fù)大鼠軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究目的：在SD大鼠軟骨缺損模型中，應(yīng)用多種聚合體生物材料作為充填和修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損，比較其大體和組織學(xué)觀察結(jié)果，以得到適合的聚合體生物材料。 方法：取SD大鼠100只，雌雄不限，體重250±20g。分別編號(hào)標(biāo)記后隨機(jī)分為A組(自然修復(fù)組)、B組(透明質(zhì)酸水凝膠組)、C組(藻酸鈉海綿組)、D組(復(fù)合透明質(zhì)酸海綿組)和E組(復(fù)合海綿組)，每組18只。剩余10只取SD

4、大鼠的劍突，經(jīng)酶學(xué)解離細(xì)胞法獲取軟骨細(xì)胞。在大鼠的股骨滑車上鉆孔造成軟骨損傷，比較其大體和組織學(xué)觀察結(jié)果以及生物化學(xué)評(píng)估修復(fù)區(qū)的膠原含量。 結(jié)果：通過(guò)透明質(zhì)酸水凝膠完成修復(fù)的軟骨與用復(fù)合透明質(zhì)酸鈉海綿和復(fù)合海綿軟骨細(xì)胞修復(fù)軟骨作比較，在大體外觀上有一個(gè)相類似的表面。與藻酸鹽海綿組比較透明質(zhì)酸水凝膠和復(fù)合海綿軟骨細(xì)胞組得到的大體和組織學(xué)積分最高(分別是P＜0.01和P＜0.05)。而且在生物化學(xué)評(píng)估證實(shí)了在修復(fù)區(qū)存在相似數(shù)量的膠原

5、纖維。 結(jié)論：在水凝膠或復(fù)合海綿軟骨細(xì)胞組證實(shí)其增殖細(xì)胞能合成高含量透明質(zhì)酸基質(zhì)。形成的基質(zhì)最后轉(zhuǎn)變成網(wǎng)架。外援透明質(zhì)酸和/或軟骨細(xì)胞藻酸鹽海綿明顯地改善大體和組織學(xué)積分(分別P＜0.05和P＜0.01)。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)復(fù)合海綿軟骨細(xì)胞組在大體及組織學(xué)上形成的膠原纖維和軟骨細(xì)胞形成最高，為最佳多聚體生物材料。 2關(guān)節(jié)內(nèi)出血對(duì)關(guān)節(jié)軟骨影響的實(shí)驗(yàn)研究目的：探討短期關(guān)節(jié)內(nèi)出血對(duì)關(guān)節(jié)軟骨產(chǎn)生的影響及病理變化過(guò)程。 方法：采用

6、關(guān)節(jié)內(nèi)注入自體血的方法制造關(guān)節(jié)內(nèi)出血模型。大耳白兔36只隨機(jī)分為2組，每組18只。第1組：右后膝關(guān)節(jié)內(nèi)注入自體靜脈血4ml，左后膝關(guān)節(jié)作為空白對(duì)照，在第3天重復(fù)一次，劑量同第1天。第2組：右后膝關(guān)節(jié)內(nèi)注入自體血4ml,左后膝關(guān)節(jié)2ml，其余步驟與第1組完全相同。分別于1周、4周、8周取材，測(cè)定水、蛋白多糖以及膠原含量的改變，同時(shí)進(jìn)行大體及普通光鏡觀察。 結(jié)果(1)受出血影響，第1、4周含水率都顯著增加(均為P＜0.05)，第8周

7、時(shí)與對(duì)照組無(wú)明顯差異(P＞0.05)。膠原含量在第1周低于對(duì)照組(P＜0.05)，4ml組重于2ml組，第4、8周與對(duì)照組間均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。淺層在第1周及第4周明顯低于對(duì)照組(均P＜0.05)，第8周與對(duì)照組間無(wú)明顯差異(P＞0.05)，第4周大于第1周(P＜0.05)，8周大于第4周(P＜0.05)。中間層在第1周低于對(duì)照組(P＜0.05)，第4、8周與對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異(均P＞0.05)，第4、8周均大于第1周(

8、P＜0.05)，第8周與第4周間無(wú)顯著差異(P＞0.05)。深層各組與對(duì)照組之間均無(wú)顯著性差異(均P＞0.05)。關(guān)節(jié)軟骨色澤稍暗，表面粗糙，第1周最為明顯。 (2)HE染色結(jié)果：實(shí)驗(yàn)側(cè)軟骨表面不光滑，細(xì)胞排列欠整齊，細(xì)胞分裂相增多，可見軟骨細(xì)胞簇聚，潮線變模糊。4ml側(cè)比2ml側(cè)變化明顯。 (3)Ⅱ型膠原免疫組化染色：第1周，軟骨表層染色稍變淡，軟骨細(xì)胞周圍濃染區(qū)染色無(wú)明顯變化。第4周以后未見明顯變化。 (4)

9、含水率的改變：①與空白對(duì)照組比較：第4周低于第1周(P＜0.05)。第8周低于第4周(P＜0.05)；②4ml與2ml兩實(shí)驗(yàn)組的比較：在第1周及第4周，4ml組含水率顯著大于2ml組(均P＜0.05)，在第8周兩組間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 (5)關(guān)節(jié)軟骨各層蛋白多糖含量的改變：①與對(duì)照組比較：②4ml與2ml兩實(shí)驗(yàn)組的比較：淺層在第1、4周，4ml組均低于2ml組(均為P＜0.05)。兩組在第8周無(wú)顯著性差異(P＞0.0

10、5)；中間層在第1周4ml組低于2ml組(P＜0.05)，在第4周及第8周，兩組無(wú)顯著性差異(均P＜0.05)；深層在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上兩組間均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 (6)膠原含量的改變：①與對(duì)照組比較：在第1周膠原低于對(duì)照組(P＜0.05)，第4、8周與對(duì)照組間均無(wú)明顯差異(P＞0.05)，第4、8周均大于第1周(P＜0.05)；②4ml與2ml兩實(shí)驗(yàn)組的比較：4ml組在第1周低于2ml組(P＜0.05)，在第4周及第8周

11、兩組間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 結(jié)論(1)關(guān)節(jié)內(nèi)出血模型能很好的模擬運(yùn)動(dòng)損傷或其它情況下關(guān)節(jié)內(nèi)出血的病理狀態(tài)，并可觀察不同劑量的血液對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的影響。 (2)不同量的關(guān)節(jié)內(nèi)出血對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的影響不同，量大者對(duì)含水率、蛋白多糖、膠原的影響大于量小者。 (3)臨床上應(yīng)引起對(duì)關(guān)節(jié)內(nèi)出血的重視，在條件允許的情況下，盡量進(jìn)行穿刺，以減少血液對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的影響。 3關(guān)節(jié)鏡下自體骨軟骨移植修復(fù)骨軟骨缺損的臨床研究目的

12、：探討關(guān)節(jié)鏡下自體骨軟骨鑲嵌式移植術(shù)治療負(fù)重面關(guān)節(jié)軟骨損傷缺損的可行性。 方法：20例股骨關(guān)節(jié)面軟骨缺損患者，男14例，女5例；年齡18～45歲，平均29歲；左膝13例，右膝7例。按照Brittberg-Peterson功能評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，膝關(guān)節(jié)的功能為65～105分，平均80.65±9.69分。3例無(wú)明顯外傷史，但有風(fēng)濕病史；17例有外傷史，均有膝關(guān)節(jié)疼痛，大腿肌肉萎縮。3例伴絞鎖，2例伴彈響。17例外傷患者為股骨外髁負(fù)重面局灶性軟

13、骨損傷，均為單創(chuàng)面，損傷范圍2.5～3.0cm2；3例無(wú)外傷患者為股骨內(nèi)髁負(fù)重面局灶性軟骨軟化或軟骨剝脫，損傷范圍2.0～2.5cm2。采用鑲嵌式骨軟骨移植器，在關(guān)節(jié)鏡下取膝關(guān)節(jié)非負(fù)重關(guān)節(jié)面骨軟骨條，將之移植修復(fù)膝關(guān)節(jié)負(fù)重面的局灶性軟骨缺損。 結(jié)果：術(shù)后隨訪10～20個(gè)月，平均15個(gè)月，患者的臨床癥狀消失，關(guān)節(jié)活動(dòng)度正常，術(shù)后采用Brittberg-Peterson功能評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定，16例為0分，4例因活動(dòng)時(shí)輕微疼痛分別評(píng)為6～