1、研究背景:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，SLE)是一種常見典型的自身免疫性疾病，其免疫學(xué)特征為患者體內(nèi)的多克隆自身反應(yīng)性T、B淋巴細胞激活，產(chǎn)生抗核小體抗體家族(抗核小體抗體、抗組蛋白抗體、抗dsDNA抗體)等大量自身抗體。該病可造成全身多系統(tǒng)、多臟器損害，尤以腎臟損害最嚴重。SLE病因至今尚未完全明確，可能涉及遺傳背景、環(huán)境暴露、感染、藥物、激素紊亂和免疫異常等因素，其中細胞凋亡異常已成為SLE

2、免疫學(xué)發(fā)病機制研究熱點之一。 動物模型研究發(fā)現(xiàn)，細胞凋亡相關(guān)基因的缺陷如fas和fasL基因的缺陷，可直接引起鼠狼瘡樣綜合征；人群研究也顯示SLE患者外周血淋巴細胞、單核細胞、粒細胞凋亡增加和(或)吞噬細胞對凋亡細胞的清除功能減弱，造成晚期凋亡細胞積聚過多，且免疫系統(tǒng)對其識別發(fā)生障礙，從而打破自身免疫耐受。而且已有研究表明DNA的免疫原性并不強，不是SLE的主要致病自身抗原。眾多研究提示細胞凋亡過程中細胞膜分子的重新分布、修飾以

3、及凋亡小體破裂釋放出的核小體才是SLE真正的“驅(qū)動性抗原”，即凋亡釋放出的核小體及胞質(zhì)大分子等作為自身抗原，被樹突狀細胞識別、遞呈給細胞毒性T細胞及輔助性T細胞，激活自身反應(yīng)性B細胞，產(chǎn)生自身抗體，繼而形成循環(huán)免疫復(fù)合物，沉積于全身多個器官，造成多系統(tǒng)的多臟器損害。 目的:比較系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，SLE)患者和正常對照兩組間的外周血單個核細胞(peripheralbloodmon

4、onuclearcells，PBMCs)的早期凋亡率及其膜上Fas(membrane-boundFas，mFas)／FasL(membrane-boundFasL，mFasL)、血清可溶性Fas(serumsolubleFas，sfas)／FasL(serumsolubleFasL，sFasL)、與血清可溶性核小體(serumsolublenucleosome)及抗核小體抗體家族分子(thelargefamilyofantinucleo

5、someantibodies)(包括抗核小體抗體、抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體)的表達水平；分析PBMCs早期凋亡率與SLE患者自身抗體和疾病活動度的關(guān)系，考察PBMCs早期凋亡率、mFas、mFasL、sfas和sFasL、核小體及抗核小體抗體家族分子與SLE患者器官／系統(tǒng)損害之間的關(guān)系，并探討mFas、mFasL、sfas、sFasL和核小體及抗核小體抗體家族與患者器官／系統(tǒng)損害的關(guān)聯(lián)是否涉及細胞凋亡。 方法:病例組選自兩

6、所三甲醫(yī)院住院SLE患者，以健康個體為正常對照組；參照系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動性指數(shù)(SystemicLupusErythematosusDiseaseActivityIndex，SLEDAI)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡損傷指數(shù)(SystemicLupusIntemationalCollaborativeClinics／AmericanCollegeofRheumatologyDamageIndex，SLICC／ACRDI)量表，設(shè)計問卷，收集患者

7、的一般情況和器官／系統(tǒng)損害資料。利用流式細胞儀，采用連接素V(annexinV，AV)和碘化丙啶(propidiumiodide，PI)雙染法檢測研究對象的PBMCs早期凋亡率；運用流式細胞術(shù)，檢測PBMCs膜上mFas和mFasL的表達；以雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗測定研究對象外周血sfas和sFasL、可溶性核小體及抗核小體抗體家族分子的表達水平。資料分析采用廣義線性模型。 結(jié)論SLE患者的PBMCs早期凋亡率顯著升高，且與患