1、隨著獸醫(yī)臨床菌株耐藥性逐年上升，多重耐藥及泛耐藥現(xiàn)象越來越嚴重。但是新獸藥的研發(fā)進展較緩慢，價格昂貴，對早期特別是不容易引起耐藥性的藥物的重新應(yīng)用可作為控制多重耐藥菌株導(dǎo)致的疾病的首要選擇。本論文初步研究了雞源大腸桿菌中質(zhì)粒介導(dǎo)氟苯尼考耐藥基因floR的流行狀況和傳播機制，為減少氟苯尼考耐藥菌株的出現(xiàn)和減緩耐藥的程度提供依據(jù)，為解決獸醫(yī)臨床耐藥性傳播問題提供新思路。
　　本研究對2013～2014年分離自常州地區(qū)的80株雞源大腸桿

2、菌，首先，采用PCR方法檢測質(zhì)粒介導(dǎo)氟苯尼考耐藥基因floR，并以微量肉湯稀釋法測定80株大腸桿菌對阿莫西林、氟苯尼考、黏菌素、鏈霉素、恩諾沙星、多西環(huán)素、頭孢喹肟、安普霉素的體外最小抑菌濃度。其次，采用大腸桿菌系統(tǒng)進化分群對80株大腸桿菌的親緣關(guān)系進行判定。第三，對78株floR陽性菌株進行接合實驗，對得到的疑似接合子通過最小抑菌濃度和PCR兩種方法進行鑒定，并分析供體菌、受體菌、接合子三者的最小抑菌濃度以及接合子中floR耐藥基因的

3、轉(zhuǎn)移情況。第四，取接合實驗成功的菌株進行脈沖場凝膠電泳(PFGE)并通過Southern雜交等方法研究floR的傳播方式以及floR耐藥基因的定位。研究結(jié)果如下:
　　80株禽源大腸桿菌oR基因檢出率為97.50％(78/80)。floR基因在禽源大腸桿菌中具有相當(dāng)高的流行率。細菌對各藥物的耐藥率分別為:阿莫西林96.25％(77/80)、氟苯尼考90.00％(72/80)、黏菌素80.00％(64/80)、鏈霉素75.00％(6

4、0/80)、恩諾沙星72.50％(58/80)、多西環(huán)素56.25％(45/80)、安普霉素18.75％(15/80)。說明本研究中禽源大腸桿菌對氟苯尼考等大多藥物都有顯示嚴重的耐藥情況。
　　通過大腸桿菌種族系統(tǒng)進化分析，80株禽源大腸桿菌中，非致病性菌株(A)為35.00％(28/80)、低致病性菌株(B1)35.00％(28/80)、高致病性菌株(B2)2.50％(2/80)和高致病性菌株(D)27.50％(22/80)。<

5、br>　　78株floR陽性菌株接合實驗結(jié)果表明，接合實驗的接合率為62.83％(49/78)，floR接合子對氟苯尼考的MIC值比受體菌升高了16-32倍，而比供體菌MIC降低了2-8倍。同時發(fā)現(xiàn)接合子對阿莫西林、黏菌素、鏈霉素、恩諾沙星、多西環(huán)素、安普霉素的MIC值也發(fā)生了相應(yīng)的變化，由此得出氟苯尼考和其它常見藥物的耐藥性存在共傳遞效應(yīng)。且49株接合子中均含有floR耐藥基因。挑取的TM10、TM12和WJ13菌株檢測進行脈沖場凝膠