1、【背景】近年來,全球T2DM的發(fā)病率急劇增加,T2DM已成為嚴(yán)重威脅人類健康的重要公共衛(wèi)生問題。盡管學(xué)術(shù)界與管理機(jī)構(gòu)對T2DM的流行狀況已有充分了解,對其發(fā)病的危險(xiǎn)因素如遺傳易感性、肥胖、少動、精神壓力等認(rèn)識也逐漸清晰,T2DM的臨床治療效果也取得顯著進(jìn)展,然而問題是,T2DM的流行仍然呈現(xiàn)惡性激增的態(tài)勢,由“治”前移到“防”的研究還處于探索階段并且進(jìn)展緩慢。問題的關(guān)鍵在于T2DM的致因、信號調(diào)控特別是圍繞糖脂代謝異常、IR的發(fā)生機(jī)制還

2、有許多“瓶頸”沒有突破。我們的前期基因篩查結(jié)果顯示,在易于發(fā)生氧化應(yīng)激誘導(dǎo)IR的個(gè)體中,轉(zhuǎn)錄因子Nrf2和TCF2的表達(dá)均顯著下調(diào)。進(jìn)一步的研究表明,作為核轉(zhuǎn)錄因子既受上游信號分子的調(diào)控,激活后的Nrf2和TCF2又能調(diào)控一系列影響IR的分子,兩種轉(zhuǎn)錄因子在T2DM的發(fā)病中可能發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)控作用。那么,上調(diào)Nrf2和TCF2是否能夠降低血糖、改善IR和保護(hù)β細(xì)胞功能?Nrf2和TCF2是否存在相互調(diào)控作用?能否發(fā)現(xiàn)更新、更有效的以Nrf

3、2和TCF2為靶點(diǎn)的候選藥物?這些都是研究T2DM發(fā)病機(jī)制和治療策略亟待解決的重大科學(xué)問題,對于闡明Nrf2和TCF2分子在T2DM發(fā)生中的關(guān)鍵作用、發(fā)現(xiàn)新的候選藥物、控制T2DM暴發(fā)流行,具有非常重大的意義。
　　【目的】(1)研究轉(zhuǎn)錄因子Nrf2調(diào)控的氧化還原平衡失調(diào)在高血糖氧化損傷、IR和β細(xì)胞損傷中的作用機(jī)制。
　　(2)闡明Nrf2-抗氧化酶鏈在降血糖、改善IR和β細(xì)胞損傷中的作用及OA的調(diào)控機(jī)制。
　　(3

4、)探討胰島素對Nrf2-氧化還原平衡的調(diào)控作用。
　　(4)研究轉(zhuǎn)錄因子TCF2的功能及在IR和β細(xì)胞損傷中的作用與RA的調(diào)控機(jī)制。
　　(5)探討轉(zhuǎn)錄因子Nrf2和TCF2的相互調(diào)控作用及在T2DM發(fā)病中的作用機(jī)制。
　　【方法】(1)Nrf2-抗氧化酶鏈在高糖氧化損傷中的調(diào)控機(jī)制。高水平葡萄糖和RSG培養(yǎng)肝細(xì)胞,觀察高糖對細(xì)胞的毒性作用和RSG對細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)制。使用MTT測定細(xì)胞活力,使用DCFH-DA熒光探

5、針測定細(xì)胞ROS生成,利用Western blot和免疫熒光測定相關(guān)蛋白表達(dá)。
　　(2)Nrf2-抗氧化酶鏈在ROS誘導(dǎo)IR中的調(diào)控機(jī)制。在傳統(tǒng)高脂飲食誘導(dǎo)IR動物模型的基礎(chǔ)上,使用高脂高糖飲食合并注射氧化劑(tBHP)誘導(dǎo)IR動物模型;并使用葡萄糖氧化酶,通過尾靜脈注射,創(chuàng)建快速構(gòu)建IR動物模型的方法。測定空腹血糖、腹腔注射葡萄糖耐量和胰島素耐量,測定血清FFAs含量。透射電鏡觀察肝組織結(jié)構(gòu)變化。RT-PCR測定相關(guān)因子mRN

6、A表達(dá)。測定Na+/K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性以及線粒體呼吸鏈酶復(fù)合物活性。Western blot測定相關(guān)蛋白表達(dá)和胰島素信號傳導(dǎo)。
　　(3)Nrf2-抗氧化酶鏈在ROS誘導(dǎo)β細(xì)胞損傷中的調(diào)控機(jī)制。免疫組化和免疫熒光觀察轉(zhuǎn)錄因子Nrf2在大鼠胰島中的分布以及在INS-1β細(xì)胞中的亞細(xì)胞分布。FFAs處理INS-1細(xì)胞,MTT測定細(xì)胞活力,Hoechst測定細(xì)胞凋亡,DCFH-DA測定ROS生成,Western bl

7、ot測定Nrf2和抗氧化酶的表達(dá),ELISA測定GSIS,RT-PCR測定相關(guān)因子mRNA表達(dá)。合成針對Nrf2的siRNA和過表達(dá)Nrf2的腺病毒,觀察Nrf2對細(xì)胞活力和FFAs細(xì)胞毒性的影響。觀察短期和長期HF飲食對Nrf2和胰島素分泌的影響。使用各種抑制劑,明確FFAs影響Nrf2表達(dá)的信號通路。觀察INS-1細(xì)胞GSIS過程中,ROS生成和Nrf2表達(dá)變化。
　　(4)胰島素對Nrf2-氧化還原平衡的調(diào)節(jié)作用及機(jī)制。10

8、0nM胰島素培養(yǎng)BRL-3A肝細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn),觀察胰島素在體外對Nrf2氧化還原平衡的影響。大鼠、小鼠腹腔注射10IU/kg胰島素,取不同時(shí)間點(diǎn)肝組織,觀察胰島素在體內(nèi)對Nrf2氧化還原平衡的影響。使用DCFH-DA熒光探針,觀察100nM胰島素培養(yǎng)BRL-3A肝細(xì)胞1.5h時(shí)間內(nèi)ROS生成動態(tài)變化。Western blot測定轉(zhuǎn)錄因子Nrf2和各種抗氧化酶的表達(dá)以及胰島素下游信號通路。使用抑制劑,驗(yàn)證胰島素調(diào)控Nrf2-氧化還原平衡的

9、信號途徑。
　　(5)OA通過激活Nrf2-抗氧化酶鏈對IR和β細(xì)胞損傷的修復(fù)機(jī)制。db/db糖尿病小鼠腹腔注射OA,持續(xù)2周。測定FBG、IPGTT、IPITT。測定動物體重,觀察內(nèi)臟脂肪含量、照相。取肝組織,測定肝細(xì)胞胰島素信號。制作胰腺組織冰凍切片,TUNEL法測定組織胰島細(xì)胞凋亡。使用FFAs和OA培養(yǎng)INS-1細(xì)胞,測定細(xì)胞活力和GSIS。Annexin Ⅴ-FITC/PI雙染檢測INS-1細(xì)胞凋亡。Western bl

10、ot檢測Nrf2、抗氧化酶表達(dá)和相關(guān)激酶磷酸化。使用siNrf2觀察Nrf2在OA保護(hù)β細(xì)胞中的作用。使用Akt、ERK和PPARγ抑制劑,研究OA調(diào)控Nrf2的信號通路。
　　(6)轉(zhuǎn)錄因子TCF2的關(guān)鍵作用與RA的調(diào)控機(jī)制。免疫熒光觀察TCF2在BRL-3A細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位。分離大鼠胰腺,免疫組化和免疫熒光觀察TCF2在胰島中的分布。INS-1細(xì)胞免疫熒光觀察TCF2在β細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位。BRL-3A細(xì)胞分別進(jìn)行siTCF

11、2干涉和TCF2慢病毒過表達(dá)處理,測定胰島素信號。大鼠尾靜脈注射TCF2慢病毒,測定FBG,進(jìn)行IPGTT和IPITT實(shí)驗(yàn),測定肝組織胰島素信號。TCF2慢病毒聯(lián)合GOX處理大鼠,測定FBG,進(jìn)行IPGTT和IPITT實(shí)驗(yàn),測定肝組織胰島素信號。INS-1細(xì)胞分別進(jìn)行siTCF2干涉和TCF2慢病毒過表達(dá)處理,測定GSIS。RA處理BRL-3A細(xì)胞,測定TCF2表達(dá)和胰島素信號。RA單獨(dú)或與FFAs處理INS-1細(xì)胞,測定TCF2和胰島

12、素分泌相關(guān)因子表達(dá),檢測GSIS。
　　(7)Nrf2-TCF2相互作用及OA-RA聯(lián)合干預(yù)機(jī)制。BRL-3A分別轉(zhuǎn)染過表達(dá)Nrf2腺病毒和過表達(dá)TCF2慢病毒,Western blot測定Nrf2、TCF2、抗氧化酶和糖代謝相關(guān)因子的表達(dá)。使用DHE熒光探針測定BRL-3A細(xì)胞和TCF2-BRL-3A細(xì)胞的ROS含量,激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞儀進(jìn)行測定。不同濃度GOX分別處理BRL-3A細(xì)胞和TCF2-BRL-3A細(xì)胞,MTT

13、測定細(xì)胞活力,鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。GOX處理BRL-3A細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn),Western blot測定Nrf2和TCF2的表達(dá)。STZ誘導(dǎo)大鼠發(fā)生高血糖,腹腔注射OA、RA和OA+RA半劑量聯(lián)合給藥,觀察FBG變化,Western blot測定胰腺Nrf2和TCF2的表達(dá)。不同濃度STZ處理INS-1細(xì)胞,測定ROS含量和GSIS。TCF2-INS-1細(xì)胞轉(zhuǎn)染過表達(dá)Nrf2腺病毒,觀察STZ對GSIS影響的變化。
　　【結(jié)果】(1)高

14、水平葡萄糖使肝細(xì)胞活力顯著降低,產(chǎn)生明顯的細(xì)胞毒性。隨著葡萄糖濃度增加,ROS生成逐漸增加。低濃度葡萄糖促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子Nrf2表達(dá)。在高糖作用下,Nrf2和一系列抗氧化酶的表達(dá)明顯降低。此外,高糖還導(dǎo)致PPARγ表達(dá)降低、COX-2表達(dá)降低,促進(jìn)PKC磷酸化,減弱Akt和ERK磷酸化。RSG可以顯著抑制高糖的細(xì)胞毒性,抑制ROS生成,并上調(diào)PPARγ和Nrf2。PPARγ抑制劑顯著抑制RSG對Nrf2、COX-2表達(dá)和Akt、ERK磷酸化

15、的影響,而對PKC磷酸化無顯著影響。
　　(2)氧化劑tBHP加劇HF飲食誘導(dǎo)的血脂紊亂,加重HF飲食誘導(dǎo)的動物胰島素敏感性降低和糖耐量受損,促進(jìn)HF飲食誘導(dǎo)的胰島素信號紊亂,誘導(dǎo)線粒體損傷和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,加劇HF飲食誘導(dǎo)的Nrf2-抗氧化酶鏈紊亂。GOX誘導(dǎo)大鼠糖耐量和胰島素耐量受損,誘導(dǎo)大鼠胰島素信號紊亂,影響JNK、ERK、p38的磷酸化,誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體功能障礙,誘導(dǎo)氧化應(yīng)激和抑制Nrf2-抗氧化酶鏈。抗氧化劑NAC抑

16、制GOX誘導(dǎo)的IR。
　　(3)生理狀態(tài)下,胰島存在少量Nrf2表達(dá),Nrf2主要位于胰島β細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。脂毒性可以明顯誘導(dǎo)β細(xì)胞凋亡、胰島素合成分泌相關(guān)因子表達(dá)降低和胰島素分泌功能的降低。低劑量的FFAs促進(jìn)Nrf2和各種抗氧化酶的表達(dá),使細(xì)胞活力增強(qiáng)。高劑量的FFAs抑制Nrf2和各種抗氧化酶的表達(dá),使細(xì)胞活力降低。siNrf2明顯抑制低劑量FFAs誘導(dǎo)的各種抗氧化酶的表達(dá)和細(xì)胞活力的增強(qiáng),并顯著降低GSIS。過表達(dá)Nrf2

17、的腺病毒可以顯著抑制高劑量FFAs誘導(dǎo)的GSIS和細(xì)胞活力的降低。短期高脂飲食促進(jìn)動物胰島素分泌和胰腺Nrf2表達(dá),長期高脂飲食抑制動物胰島素分泌和胰腺Nrf2表達(dá)。FFAs促進(jìn)線粒體和NADPH氧化酶生成ROS。低劑量的FFAs促進(jìn)Akt和ERK磷酸化。抑制ROS生成和Akt、ERK磷酸化,可以顯著抑制低劑量FFAs誘導(dǎo)的Nrf2表達(dá)。INS-1β細(xì)胞GSIS過程偶聯(lián)Nrf2表達(dá)的一過性升高。
　　(4)胰島素處理細(xì)胞和動物不同

18、時(shí)間點(diǎn),轉(zhuǎn)錄因子Nrf2和各種抗氧化酶表達(dá)的變化趨勢主要表現(xiàn)為先升高后降低到基礎(chǔ)水平。Nrf2核轉(zhuǎn)位也表現(xiàn)為先升高后降低。使用siNrf2可以顯著抑制胰島素誘導(dǎo)的各種抗氧化酶的表達(dá)。胰島素作用下,細(xì)胞內(nèi)ROS含量顯著升高,最高點(diǎn)出現(xiàn)在胰島素作用后30min左右。抗氧化劑、DPI和3NP可以顯著抑制胰島素促進(jìn)ROS的生成。胰島素作用下,Akt和ERK磷酸化變化趨勢與Nrf2表達(dá)變化趨勢相似,抑制Akt和ERK的磷酸化,胰島素刺激的Nrf2

19、表達(dá)被顯著抑制。胰島素預(yù)處理保護(hù)細(xì)胞抵御tBHP誘導(dǎo)的細(xì)胞活力的降低和細(xì)胞凋亡,干涉Nrf2后,胰島素的保護(hù)作用明顯減弱。
　　(5)OA對db/db糖尿病小鼠具有明顯的降血糖、改善IR和保護(hù)β細(xì)胞作用。OA使db/db糖尿病小鼠體重增加明顯減慢、內(nèi)臟脂肪減少,促進(jìn)鼠脂肪分解。在db/db糖尿病小鼠中,OA通過激活Nrf2-抗氧化酶鏈抑制db/db小鼠胰島細(xì)胞凋亡。OA抑制FFAs誘導(dǎo)的INS-1細(xì)胞活力、GSIS的降低和細(xì)胞凋亡

20、。干涉Nrf2后,OA對INS-1細(xì)胞脂毒性的保護(hù)作用明顯減弱。抑制Akt、ERK和PPARγ后,OA對Nrf2的激活明顯減弱。
　　(6)正常條件下,BRL-3A細(xì)胞中,TCF2在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá),主要位于細(xì)胞質(zhì)中。干涉TCF2后,BRL-3A細(xì)胞的胰島素信號明顯減弱。穩(wěn)定表達(dá)TCF2的TCF2-BRL-3A細(xì)胞中,GLUT2和GCK表達(dá)顯著增強(qiáng),PEPCK表達(dá)顯著降低,胰島素信號顯著增強(qiáng)。注射TCF2慢病毒的大鼠,胰島

21、素敏感性顯著增強(qiáng),并對GOX誘導(dǎo)的IR產(chǎn)生明顯抵抗。在大鼠胰腺組織中,TCF2主要位于分泌胰島素的胰島β細(xì)胞中。在INS-1細(xì)胞中,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核都有TCF2表達(dá),TCF2主要位于細(xì)胞質(zhì)。干涉TCF2后,INS-1細(xì)胞的GSIS明顯減弱。穩(wěn)定表達(dá)TCF2的TCF2-INS-1細(xì)胞中,GLUT2和GCK表達(dá)顯著增強(qiáng),PDX-1表達(dá)顯著降低,GSIS也顯著降低。RA處理BRL-3A細(xì)胞后,TCF2表達(dá)劑量依賴性增加,胰島素信號顯著增強(qiáng),并可

22、以明顯地抑制GOX誘導(dǎo)的胰島素信號的紊亂。RA處理INS-1細(xì)胞后,TCF2表達(dá)顯著增強(qiáng),GSIS明顯增強(qiáng),伴隨著GLUT2、GCK和PDX-1表達(dá)的顯著增強(qiáng)。RA可以顯著抑制FFAs引起的脂毒性。
　　(7)與BRL-3A細(xì)胞相比,過表達(dá)Nrf2后,各種抗氧化酶表達(dá)顯著增加,而對TCF2和PPARγ表達(dá)無顯著影響。過表達(dá)TCF2后,抗氧化酶SOD1的表達(dá)顯著降低,而GCLm和GPx1的表達(dá)顯著增加。此外,過表達(dá)TCF2使PPAR

23、γ的表達(dá)顯著增加。過表達(dá)TCF2未對Nrf2和其它抗氧化酶的表達(dá)產(chǎn)生直接的影響。過表達(dá)TCF2后,ROS含量顯著增加。GOX作用下,BRL-3A細(xì)胞中Nrf2和TCF2的表達(dá)都表現(xiàn)為先升高后降低。TCF2-BRL-3A細(xì)胞對GOX毒性的抵抗明顯增強(qiáng)。OA和RA單獨(dú)應(yīng)用都可以在一定程度上使STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠血糖降低，OA和RA半劑量聯(lián)合應(yīng)用降血糖效果更為明顯。STZ處理，使INS-1細(xì)胞活力和GSIS明顯降低。與INS-1細(xì)胞相比，過

24、表達(dá)TCF2的TCF2-INS-1細(xì)胞對STZ毒性的抵抗明顯增強(qiáng)。TCF2-INS-1細(xì)胞轉(zhuǎn)染過表達(dá)Nrf2的腺病毒，可進(jìn)一步增強(qiáng)細(xì)胞抵抗STZ的能力。
　　【結(jié)論】(1)在肝細(xì)胞中，葡萄糖可以激活PKC促進(jìn)ROS的生成，低水平葡萄糖生成低水平的ROS，激活Nrf2和下游抗氧化酶，發(fā)揮抗氧化防御作用;高水平的葡萄糖生成高水平的ROS，下調(diào)Nrf2和下游抗氧化酶，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激損傷。Nrf2調(diào)控的抗氧化酶在機(jī)體內(nèi)構(gòu)成了一個(gè)潛在的“抗氧

25、化酶鏈”，以此抵御氧化應(yīng)激損傷。一旦ROS生成過量，Nrf2調(diào)控的抗氧化酶鏈?zhǔn)艿綋p傷，導(dǎo)致氧化應(yīng)激損傷持續(xù)加重。Nrf2一抗氧化酶鏈損傷是高糖誘導(dǎo)氧化應(yīng)激損傷的關(guān)鍵。RS G一方面通過不依賴于PPARy的途徑抑制PKC而阻斷ROS生成，另一方面通過PPARy依賴性途徑激活Nrf2和下游抗氧化酶促進(jìn)ROS的清除。
　　(2)氧化劑tBHP通過誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，加劇HF飲食誘導(dǎo)的IR。無論在體內(nèi)還是在體外，GOX可以通過生成ROS，下調(diào)N

26、rf2調(diào)控的抗氧化酶鏈，影響多種相關(guān)因素，包括PPARy降低、MAPKs磷酸化改變、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體損傷等，最終導(dǎo)致胰島素信號紊亂、糖耐量和胰島素耐量異常，出現(xiàn)FBG升高。盡管還需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)明確相關(guān)分子機(jī)制，現(xiàn)在有的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，ROS的生成是IR發(fā)生的根本誘因，Nrf2一抗氧化酶鏈在IR中發(fā)揮著關(guān)鍵性的防御作用。本實(shí)驗(yàn)創(chuàng)建了一種利用GOX快速構(gòu)建IR動物模型的方法，并為ROS在IR發(fā)生中的關(guān)鍵作用以及通過Nrf2一抗氧化酶鏈對I

27、R進(jìn)行預(yù)防和治療提供新的思路。
　　(3) ROS在p細(xì)胞維持正常功能和功能障礙中發(fā)揮著雙刃劍的作用。FFAs長期暴露通過促進(jìn)ROS生成，影響p細(xì)胞葡萄糖感受能力和胰島素分泌功能。FFAs產(chǎn)生的一定劑量的ROS和伴隨GSIS過程生成的ROS可以通過ERK和Akt信號激活Nrf2一抗氧化酶鏈。Nrf2的這種激活作用反映了機(jī)體增強(qiáng)抗氧化防御系統(tǒng)抵御氧化應(yīng)激損傷的適應(yīng)性保護(hù)能力。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Nrf2一抗氧化酶鏈在決定ROS作用方向和保護(hù)p

28、細(xì)胞抵御氧化應(yīng)激損傷中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。
　　(4)胰島素可以通過Nrf2誘導(dǎo)一系列抗氧化酶的表達(dá)。胰島素誘導(dǎo)的這些抗氧化酶的有序激活在體內(nèi)形成了一個(gè)隱形的“抗氧化酶鏈”，組成了一個(gè)牢固的抗氧化防御系統(tǒng)。線粒體和NADPH氧化酶生成的ROS激活ERK-Akt信號通路在胰島素調(diào)控Nrf2中發(fā)揮關(guān)鍵作用。胰島素通過ROS-ERK-Akt-Nrf2信號級聯(lián)對氧化還原平衡的調(diào)節(jié)作用，使我們重新認(rèn)識胰島素作用的本質(zhì)。
　　(5)氧化應(yīng)激

29、在p細(xì)胞脂毒性中發(fā)揮重要作用。OA可以顯著降低ROS生成，抑制PA對Nrf2和相關(guān)抗氧化酶的下調(diào)(HO-1, SOD2, GCLc, GCLm和GPx 1等)。此外，OA還明顯地促進(jìn)Nrf2核轉(zhuǎn)位，干涉Nrf2以后，OA的保護(hù)作用明顯減弱，說明Nrf2一抗氧化酶鏈的激活在OA的保護(hù)作用中扮演著關(guān)鍵的角色。信號通路的研究發(fā)現(xiàn)，OA使ERK和Akt的磷酸化顯著增強(qiáng)，使PPARy表達(dá)明顯增加。抑制劑U0126, LY294002和GW9662

30、可以顯著減弱OA的保護(hù)作用，說明ERK/Akt/PPARy信號通路參與了OA對胰島R細(xì)胞的保護(hù)作用。OA可以通過ERK/Akt/PPARy信號通路，激活Nrf2抗氧化系統(tǒng)，當(dāng)Nrf2被OA激活時(shí)，可以誘導(dǎo)一系列抗氧化酶的表達(dá)，這些抗氧化酶組成一個(gè)隱形的“抗氧化酶鏈”，鞏固細(xì)胞的抗氧化防御系統(tǒng)?？傊?，OA在降血糖、改善IR和保護(hù)p細(xì)胞功能中都發(fā)揮重要的角色，這其中Nrf2一抗氧化酶鏈的激活在其中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。
　　(6) TCF

31、2在正常條件下以無活性的形式存在于細(xì)胞質(zhì)中，在刺激因素作用下，TCF2在某種機(jī)制的作用下，被轉(zhuǎn)移入核內(nèi)發(fā)揮作用。在肝細(xì)胞中，TCF2促進(jìn)胰島素信號傳導(dǎo)，調(diào)控糖代謝，促進(jìn)糖原合成、糖酵解，抑制糖異生。在胰島p細(xì)胞中，TCF2同時(shí)正向、負(fù)向調(diào)控胰島素的合成和分泌，TCF2的穩(wěn)態(tài)對于p細(xì)胞的正常功能至關(guān)重要?？梢姡D(zhuǎn)錄因子TCF2在胰島素信號、糖代謝和p細(xì)胞功能中都具有重要的作用，深入研究TCF2的調(diào)控機(jī)制對于T2DM的機(jī)制研究和治療都具有重

32、要的意義。
　　(7)轉(zhuǎn)錄因子Nrf2一方面作為氧化還原系統(tǒng)的核心轉(zhuǎn)錄因子，另一方面又可以調(diào)控脂代謝;轉(zhuǎn)錄因子TCF2是調(diào)節(jié)糖代謝的重要轉(zhuǎn)錄因子，同時(shí)又可以一方面通過特定抗氧化酶交叉調(diào)控氧化還原系統(tǒng)，另一方面通過PPARy間接影響Nrf2。同時(shí)，Nrf2通過調(diào)節(jié)ROS水平，影響TCF2的功能。以ROS為中心，Nrf2和TCF2存在著密切而復(fù)雜的相互調(diào)控關(guān)系，而這些相互作用的穩(wěn)態(tài)對機(jī)體維持正常功能、抵御氧化應(yīng)激損傷和 T2DM發(fā)生發(fā)