1、目的：
　　 1．觀察MPP+對PC12細(xì)胞的活性氧水平、LDH漏出率及凋亡率的影響，并觀察RAPA對MPP+所致細(xì)胞損傷的拮抗作用；
　　 2．觀察MPP+對PC12細(xì)胞的活性氧水平、LDH漏出率及凋亡率的影響，并觀察3-MA對MPP+所致細(xì)胞損傷的協(xié)同作用；
　　 3．觀察MPP+對PC12細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響，并觀察RAPA和3-MA對細(xì)胞周期的影響。
　　 方法：
　　 用1.0mM的MP

2、P+處理PC12細(xì)胞24h，同時分別予RAPA和3-MA進行干預(yù)：LDH試劑盒檢測上清液中的LDH活性；流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率、活性氧和細(xì)胞周期的分布。
　　 結(jié)果：
　　 1．MPP+處理細(xì)胞24h，細(xì)胞活性氧水平顯著增高(P＜0.001)，上清液中LDH漏出率顯著升高(P＜0.001)，細(xì)胞凋亡率增加(P＜0.001)，G2/M期細(xì)胞明顯增多(P＜0.001)；
　　 2.25mM的RAPA顯著降低細(xì)胞的

3、活性氧水平(P＜0.001)，減少LDH漏出率(P＜0.001)，并抑制細(xì)胞凋亡(P＜0.001)，細(xì)胞阻滯于G0/G1期(P＜0.001)。
　　 3.10mM的3-MA干預(yù)MPP+處理的細(xì)胞后，進一步增加細(xì)胞內(nèi)的活性氧水平(P＜0.05)，顯著增加LDH的漏出率(P＜0.001)，促進細(xì)胞凋亡(P＜0.001)，G2/M期細(xì)胞進一步增多(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1．誘導(dǎo)自噬對MPP+所致的PC1

4、2細(xì)胞損傷表現(xiàn)出良好的拮抗作用；
　　 2．抑制自噬可加重MPP+所致PC12細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷；
　　 3．MPP+重啟細(xì)胞周期進入S期，不能完成完整的細(xì)胞周期，而阻滯于G2/M期，促進細(xì)胞凋亡的發(fā)生；誘導(dǎo)自噬使細(xì)胞阻滯于G0/G1期，部分抵抗MPP+所誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激，抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生；相比之下，抑制自噬加速了細(xì)胞進入G2/M期，損耗了細(xì)胞對MPP+所誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激的抵抗，促使細(xì)胞凋亡增加。（因此，從我們的實驗中可初