荷葉黃酮苷與苷元的制備及其降血糖初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、荷葉是一種重要的藥食兩用資源,廣泛分布于我國大部分地區(qū),黃酮類物質是其主要的活性成分。為了有效利用荷葉資源,本論文研究了荷葉總黃酮的提取、純化及其微生物酶法制備荷葉黃酮苷元的工藝條件,并初步比較了荷葉黃酮苷和苷元的降血糖及抗氧化效果。 超聲波能對荷葉組織產(chǎn)生明顯的破碎作用,超聲波輔助提取荷葉總黃酮工藝的最佳條件為:采用40倍50%的乙醇溶液,在700W的功率(20KHz)下超聲提取40min的提取效果最好,其黃酮得率可達14.4

2、9mg/g。纖維素酶法輔助提取荷葉黃酮的較佳條件是:采用0.5%的纖維素酶溶液在pH為4.5,溫度為45~50℃的緩沖液中酶解80min后,再采用50%的乙醇溶液75℃條件下浸漬提取。它們比傳統(tǒng)的溫浸法效率更高,節(jié)省能源和溶劑。大孔吸附樹脂HPD600用來純化荷葉總黃酮的效果較好,在pH為3.2左右時HPD600對荷葉黃酮的吸附量最大,使用80%的乙醇溶液解吸效果最好。當動態(tài)吸附的泄露點是4倍柱體積時,5倍柱體積80%的乙醇溶液可以洗脫

3、完全。經(jīng)初步純化得到總黃酮含量為58.2%的粉末。 為提高荷葉黃酮的生物效價,使用黑曲霉產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶可以較完全的酶解荷葉黃酮苷,得到槲皮素含量達75.34%的黃酮苷元,HPLC-MS分析證明了水解比較完全。在酶/底物為3:1,pH為4.5和溫度為45℃的條件下,酶解效率較高。轉化體系的量會影響轉化完全需要的時間,25mL荷葉黃酮(1.64mg/mL)反應6.5h可以近乎完全的酶解。 采用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型,初

4、步考察了荷葉黃酮苷元和黃酮苷的抗氧化和降血糖效果。結果表明:荷葉黃酮苷元高、低劑量組均能顯著升高肝組織的SOD、CAT‘活力(P<0.01);高劑量組能顯著降低MDA水平(P<0.01),升高GSH-Px活性(P<0.05)。荷葉黃酮苷的高劑量組也能顯著升高肝組織的CAT的活力(P<0.05)和SOD含量(P<0.05),顯著降低MDA水平(P<0.05)。荷葉黃酮苷元的抗氧化活性明顯優(yōu)于黃酮苷。荷葉黃酮苷元的高劑量組能顯著降低糖尿病小

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