1、目的：探討大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞（VSMCs）內(nèi)1 型多聚ADP 核糖聚合酶（PARP-1）與維生素D受體（VDR)相互作用及作用方式，以及PARP-1 活性對VDR靶基因（Targetgenes）轉(zhuǎn)錄的影響，進(jìn)而分析PARP-1 活性抑制劑對大血管VSMCs 增殖表型變化的影響。
　　 方法：用組織貼塊法體外培養(yǎng)大鼠胸主動脈VSMCs 作為細(xì)胞基礎(chǔ)模型，利用蛋白免疫印跡法(WB)檢測細(xì)胞核內(nèi)PARP-1 及VDR表達(dá)水平；用核

2、提取蛋白的免疫共沉淀 (co-IP)，核提取蛋白及重組VDR 蛋白的體外蛋白-蛋白相互作用試驗 (Far-WB)和多聚ADP 核糖化試驗探討PARP-1與VDR的相互作用方式（蛋白之間直接結(jié)合/PAPR-1 對VDR 進(jìn)行多聚ADP 核糖化修飾）；分別給予VDR 激動劑1α,25-二羥維生素D3［1α,25(OH)2D3］及不同劑量PARP-1 活性抑制劑3AB或PJ-34 處理VSMCs，利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR)檢測PAPR-1

3、 活性受抑制對VDR 靶基因轉(zhuǎn)錄水平的影響。
　　 結(jié)果：培養(yǎng)出大鼠胸主動脈VSMCs 并能傳代至15代作為研究對象。經(jīng)75nM1α,25(OH)2D3 處理24h的VSMCs 核提取物中VDR 不能與PARP-1或多聚ADP 核糖修飾的PARP-1 結(jié)合，亦不能被PARP-1 多聚ADP 核糖化修飾；經(jīng)同樣處理的VSMCs核提取物中的VDR 不能與重組PARP-1或多聚ADP 核糖修飾的重組PARP-1 結(jié)合，亦不能被重組PA

4、RP-1 多聚ADP 核糖化；重組VDR 不能與重組PARP-1或多聚ADP核糖修飾的重組PARP-1 結(jié)合，亦不能被重組PARP-1 多聚ADP 核糖化。VDR 靶基因Cyp24a1，Vegfa，Hgf的轉(zhuǎn)錄水平與PARP-1 活性抑制劑3AB或PJ-34 之間沒有明顯的劑量相關(guān)性，但給予活性抑制劑處理組的VSMCs中Vegfa和 Hgf的轉(zhuǎn)錄水平比單獨給予1α,25(OH)2D3 處理組更高（P<0.05）。
　　 結(jié)論：在