1、目的: 大腸癌是目前最常見惡性腫瘤之一，近年來我國的大腸癌的發(fā)病率呈上升趨勢。祖國醫(yī)學認為直腸癌的形成是濕熱蘊結日久化毒下注，積聚于腸道凝結而成腫瘤。濕熱下注、火熱內蘊、結而為腫是病之標；正氣不足、脾腎兩虧為病之本。中醫(yī)藥治療大腸癌是目前國內腫瘤治療領域一大優(yōu)勢，大量實驗及臨床案例證明，中醫(yī)藥輔助治療可以有效減輕放化療副作用。我們在臨床研究中，按照清熱解毒、益氣養(yǎng)陰、活血燥濕的治療原則，用黃白抑瘤方口服及局部治療該病取得了較好的

2、臨床療效。在本實驗中，我們擬采用人結直腸癌細胞株Colo320為研究對象，觀察黃白抑瘤方在體外對Colo320細胞的抗腫瘤作用研究，探討黃白抑瘤方對Colo320細胞增殖、凋亡，及其相關蛋白表達的影響，以明確黃白抑瘤方治療結直腸癌的生物學基礎。 方法: 使用不同濃度黃白抑瘤方體外干預Colo320細胞。采用甲基噻唑MTT比色法和生長曲線測定不同濃度黃白抑瘤方對Colo320細胞的增殖的影響。采用流式細胞術檢測不同濃度黃白

3、抑瘤方對Colo320細胞周期和凋亡率的影響，并與對照組細胞的凋亡率比較，以顯示黃白抑瘤方作用與細胞凋亡率之間的關系；Western blot檢測不同濃度黃白抑瘤方處理后Colo320細胞的增殖細胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen，PCNA)，以及凋亡相關蛋白Caspase3和PARP的表達。 結果: 黃白抑瘤方作用Colo320細胞24h后，經(jīng)MTT法檢測，OD值明顯小于對照

4、組，顯示不同濃度藥物具有不同程度的腫瘤抑制率；黃白抑瘤方作用Colo320細胞48h后，與對照組相比，細胞周期分布發(fā)生明顯改變，表現(xiàn)為S期細胞比例下降，G0/G1期和G2/M期細胞比例上升，凋亡率明顯升高；黃白抑瘤方作用Colo320細胞48h后，與對照組相比，PCNA含量顯著減少，而凋亡相關蛋白Caspase3和PARP含量顯著增加。 結論: 黃白抑瘤方能抑制人直腸癌Colo320細胞增殖，并誘導促進細胞凋亡，從而達到