1、目的： 1．以體外培養(yǎng)L6骨骼肌細(xì)胞為對(duì)象，給予一定濃度胰高血糖素樣肽-1（glucagon-like peptide-1，GLP-1）干預(yù)，檢測(cè)GLP-1對(duì)糖原合成酶表達(dá)的影響。 2．利用UO126（MAPK抑制劑）阻斷MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，檢測(cè)GLP-1對(duì)L6骨骼肌細(xì)胞糖原合成酶表達(dá)的影響，從而探討GLP-1在骨骼肌細(xì)胞中介導(dǎo)糖原合成的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。 3．為GLP-1的擬胰島素作用及其機(jī)制提供理論依據(jù)。

2、 方法： 1．復(fù)蘇L6骨骼肌細(xì)胞，通過(guò)倒置顯微鏡觀察其生長(zhǎng)及增值狀況。 2．L6骨骼肌細(xì)胞均等分為6組：A：對(duì)照組；B：GLP-1（10-9mol/L）組；C：GLP-1（10-9mol/L）+UO126（10μmol/L）組；D：胰島素（10-9mol/L）組；E：胰島素（10-9mol/L）+UO126（10μmol/L）組；F：GLP-1（10-9mol/L）+胰島素（10-9mol/L）組。A、B、C、D、E和

3、F6組分別培養(yǎng)3分鐘、30分鐘，A、B、D和F組再培養(yǎng)24小時(shí)。 3．用Western Blot和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)骨骼肌細(xì)胞中的糖原合成酶的表達(dá)。 結(jié)果： 1．GLP-1（10-9mol/L）組在3分鐘、30分鐘及24小時(shí)干預(yù)的糖原合成酶的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組（分別為1997．33±115．47 vs1444．00±94．64，P<0．05；1465．33±86．00 vs1267．33±66．46，P<0．

4、05；1426．67±24．54 vs1326．33±18．84，P<0．05，n=3）。 2．GLP-1（10-9mol/L）+胰島素（10-9mol/L）組在3分鐘、30分鐘及24小時(shí)干預(yù)的糖原合成酶的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組（分別為2209．33±186．18 vs1444±94．64，P<0．05；1565．00±15．39 vs1267．33±66．46，P<0．05；1428．00±36．51 vs1326．33±18．

5、84，P<0．05，n=3）。 3．3分鐘和30分鐘時(shí)，GLP-1（10-9mol/L）+UO126（10μmol/L）組的糖原合成酶表達(dá)均顯著低于GLP-1（10-9mol/L）組（分別為1752．67±198．65 vs1997．33±115．47，P<0．05；1395．3±78．21 vs1465．33±86．00，P<0．05，n=3），而在30分鐘時(shí)的糖原合成酶表達(dá)顯著高于對(duì)照組（1395．33±78．21 vs12