1、目的：
　　 絨癌是好發(fā)于育齡期婦女的高度惡性腫瘤，化療是目前主要的治療方法。對化療耐藥是治療失敗的主要原因。腫瘤耐藥可以是先天性的，也可以是化療后獲得的。而絨癌耐藥多數(shù)為獲得性耐藥，其耐藥機制主要包括藥理學機制和細胞機制。本研究基于5-FU/FUDR在細胞內(nèi)的代謝通路，觀察通路中相關基因的表達與絨癌細胞耐藥的關系。
　　 方法：
　　 應用CCK-8測定濃度梯度遞增法和間歇誘導法建立的絨癌耐藥細胞株的耐藥指數(shù)，

2、MTT法測定各細胞株的生長曲線，群體細胞的倍增時間。應用流式細胞術測定不同細胞株的細胞周期。應用實時熒光定量PCR方法測定各耐藥細胞株和親本細胞株5-FU/FUDR代謝通路相關基因(DPD、TP、TK和TS)的表達。應用SELDITOFMS方法初步尋找間歇誘導法終濃度耐藥細胞株和親本細胞株間是否存在顯著性差異表達的蛋白或者蛋白譜。
　　 結果：
　　 (1)與親本細胞株相比，耐藥細胞株有形態(tài)的改變，P-gp糖蛋白表達的增

3、加，耐藥性的增加，細胞周期分析，各期所占比例無顯著性差異，細胞生長速度和倍增時間也沒有明顯的差異。(2)與親本細胞株相比，5-FU和FUDR耐藥細胞株DPD基因表達下降，不同濃度耐藥株間的差異并不明顯。(3)與親本細胞株相比，5-FU和FUDR耐藥細胞株TP基因表達下降。其中FUDR高濃度耐藥株表達下降更加顯著。(4)與親本細胞株相比，5-FU和FUDR耐藥細胞株TK基因表達增加，其中間歇誘導高濃度耐藥株表達增高更加顯著。(5)與親本細

4、胞株相比，5-FU和FUDR耐藥細胞株TS基因表達增加，間斷誘導高濃度耐藥株表達增高更加顯著。(6)與親本細胞株以及FUDR高濃度(6.25mg/ml和1.25mg/ml)耐藥細胞株相比，5-FU的B濃度(0.25mg/ml)耐藥株存在3075、8401、9250Da三種異常表達的蛋白峰。
　　 結論：
　　 DPD、TP、TK和TS是5-FU/FUDR細胞內(nèi)代謝通路中相關重要酶，其基因在耐藥細胞株和親本細胞株中表達存在