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文檔簡介
1、急性白血病(atue leukemia AL)是一組異質(zhì)性惡性克隆性疾病,系造血干細胞或祖細胞突變引起的造血系統(tǒng)惡性腫瘤,發(fā)病時大量的白血病細胞在骨髓中增殖,抑制正常造血,并廣泛浸潤其他器官和組織。研究發(fā)現(xiàn)在白血病細胞不斷增殖、浸潤的過程中,粘附分子(adhesion molecules)發(fā)揮了重要作用,而血管細胞粘附分子(vascular cell adhesion molecule1,VCAM-1)作為其中的一員,可介導細胞與細胞、
2、細胞與細胞外基質(zhì)之間的粘附,并可選擇性的促進單個核細胞的粘附。以往研究表明:VCAM-1主要來源于非造血細胞,如骨髓基質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞、組織巨噬細胞及樹突狀細胞,最后研究發(fā)現(xiàn)在急性白血病初診患者血液中VCAM-1的水平異常升高,推測這種高水平的VCAM-1可能與白血病細胞自身表達的VLA4相結(jié)合,通過激活PI3K依賴的信號途徑,在白血病的增殖、分化、遷移、浸潤中發(fā)揮重要作用,有研究證實,白血病細胞存在自分泌功能,可以分泌一些細胞因子及粘
3、附因子促進自身的增值和浸潤。國外學者研究發(fā)現(xiàn)在某些類型的急性髓系白血病細胞可以表達VCAM-1,引起人們的關(guān)注。 CD34是一種分子量為105~120 KD的糖蛋白,是干細胞、祖細胞的標志,它是一種階段特異性抗原。最近有研究發(fā)現(xiàn),白血病細胞同樣具有CD34抗原的表達,且在M0、M1、M2等分化程度較差的白血病類型當中CD34多有高表達,臨床常出現(xiàn)髓外浸潤表現(xiàn),而且CD34+過度表達也可能是不良預(yù)后因素之一。 CD11
4、7是c—kit受體(c—kit receptor,c—kit R)膜外區(qū)分子表面抗原標志,其配體為干細胞因子(SCF),SCF是重要的造血生長因子,同其他細胞因子協(xié)同作用可刺激造血干/祖細胞的增殖和分化。研究表明CD117主要表達在髓系幼稚細胞上,正常的骨髓造血干細胞、定向祖細胞上CD117表達率僅為4%。但在急性髓系白血病細胞上存在CD117高表達,多出現(xiàn)在M0、M1分化程度較低的急性髓系白血病類型,并且也易出現(xiàn)髓外浸潤表現(xiàn),似與CD
5、34有良好的相關(guān)性。在CD34與CD117表達的急性髓系白血病細胞上,VCAM-1表達如何,是否具有相關(guān)性,目前尚不明確,本實驗通過對急性髓系白血病細胞VCAM-1、CD34及CD117的表達研究,探討其白血病細胞自身VCAM-1、CD34、CD117的表達情況以及VCAM-1、CD34、CD117_者之間的相關(guān)性,進一步了解VCAM-1的來源,并試圖為急性髓系白血病的預(yù)后判斷提供新的檢測指標。 材料和方法: 1、材料
6、 1.1標本的來源:16例白血病骨髓標本均來自我院血液科住院期間的急性髓系白血病患者(經(jīng)患者同意后)。 1.2采集時間:2008.4到2009.3。 1.3采集時期:16例骨髓標本采集于初診時,2骨髓標本例采集于急性髓系白血病復發(fā)時。 1.4符合條件:以上患者診斷均符合2007.8張之南、沈悌主編的第三版《血液病診斷及療效標準》關(guān)于急性白血病的診斷標準及復發(fā)、難治的診斷標準。 2、實驗步驟和方法
7、 取符合條件的患者骨髓液2ml(肝素鈉抗凝20IU/ml),并分別在PE標記的VCAM-1、CD34、CD117熒光單抗20ul中加入骨髓單個核細胞106個,室溫避光15分鐘。然后溶血法去除標本中的紅細胞,離心、去上清。加入固定液500ul后上機檢測。 3、統(tǒng)計方法 采用SPSS13軟件分析白血病細胞自身VCAM-1、CD34、CD117的表達,結(jié)果用Means±Std表示,均數(shù)的組間比較采用秩和檢驗或T檢驗(根據(jù)數(shù)
8、據(jù)是否符合正態(tài)分布決定),組間相關(guān)分析采用秩和檢驗Spearman等級相關(guān)或Pearson相關(guān)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果: 1.急性髓系白血病細胞VCAM-1表達呈低水平,與對照組比較無統(tǒng)計學差異(Z=-1.843 P=0.06)。 2.急性髓系白血病細胞CD34、CD117表達呈高水平,與對照組比較有統(tǒng)計學差異(tCD34=4.09 pCD34=0.01;tCD117=3.82 pCD117=
9、0.045)。 3.急性髓系白血病難治組與非難治組比較,CD34表達升高,有統(tǒng)計學差異(ZCD34=—2.475 pCD34=0.01);CD117表達無統(tǒng)計學差異(tCD117=1.95 pCD117=0.73)。 4.急性髓系白血病細胞VCAM-1的表達同自身CD117表達水平成正相關(guān)(r=0.51P=0.04)。 5.急性髓系白血病細胞VCAM-1表達與自身CD34表達無相關(guān)性(r=0.15 P=0.58)
10、。 6.急性髓系白血病白細胞CD34與CD117表達成正相關(guān)(r=0.511 p=0.02)。 結(jié)論: 1.急性髓系白血病細胞VCAM-1表達呈低水平,同對照組比較無統(tǒng)計學差異。 2.急性髓系白血病細胞CD34與CD117表達呈高水平,同對照組比較有顯著性差異。 3.急性髓系白血病細胞CD34表達增高可能預(yù)示疾病難治。 4.急性髓系白血病細胞CD34與CD117表達成正相關(guān)。 5.
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