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文檔簡介
1、研究背景:原發(fā)性醛固酮增多癥(簡稱原醛)是內(nèi)分泌相關(guān)性高血壓最常見的病因。目前發(fā)現(xiàn)原醛的亞型有很多種,其中產(chǎn)醛固酮瘤最為常見,約占原醛患者的60%。然而,其腎上腺皮質(zhì)腫瘤的發(fā)生和醛固酮過度分泌的分子機制至今不明。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一類長度大于200bp,可轉(zhuǎn)錄但不具有蛋白編碼功能的RNA成分。它們具有各種生物學(xué)功能,最近發(fā)現(xiàn)其異常表達(dá)可能與多種疾病的發(fā)生有關(guān)。
研究目的:
2、觀察醛固酮瘤與正常腎上腺組織中l(wèi)ncRNA表達(dá)譜的差異并對差異表達(dá)的lncRNA進行初步的信息學(xué)分析,為進一步探討其調(diào)控機制奠定基礎(chǔ)。研究對象和方法:分別提取6例醛固酮瘤和6例正常腎上腺組織的RNA,分離純化后反轉(zhuǎn)錄成cRNA,生成具有熒光標(biāo)記的cRNA產(chǎn)物后,利用lncRNA芯片技術(shù)檢測醛固酮瘤組和正常腎上腺組中l(wèi)ncRNA表達(dá)譜的差異。對原始數(shù)據(jù)進行處理、均一化后篩選出有差異表達(dá)的lncRNA,進行統(tǒng)計學(xué)和生物信息學(xué)分析。然后收集1
3、0例醛固酮瘤組織和9例正常腎上腺組織,從芯片篩選出的差異表達(dá)lncRNA中隨機選取4條,用real-time PCR技術(shù)對芯片結(jié)果進行驗證。
研究結(jié)果:lncRNA芯片一共檢測出16160條lncRNA。將醛固酮瘤組與正常對照組進行比較:其中變化在1.5倍以上且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)的認(rèn)為是表達(dá)有差異的lncRNA。與正常對照組相比,醛固酮瘤組中表達(dá)有差異的lncRNA一共檢測到1809條,其中1181條表達(dá)上調(diào),
4、628條表達(dá)下調(diào)。Real-timePCR結(jié)果顯示隨機選取的四條lncRNA中,有兩條lncRNA表達(dá)有明顯差異,另外兩條的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
研究結(jié)論:本次研究首次通過芯片技術(shù)對醛固酮瘤中l(wèi)ncRNA表達(dá)譜的變化進行了檢測。結(jié)果顯示與正常對照組相比,醛固酮瘤存在lncRNA的表達(dá)改變。驗證結(jié)果提示應(yīng)用芯片結(jié)果仍需要對有表達(dá)改變的lncRNA在擴大的臨床樣本中進一步證實。這些差異表達(dá)的lncRNA可能為進一步闡明醛固酮瘤發(fā)
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