1、背景：腰腿痛是一種常見病，已嚴(yán)重影響人們的正常生活，腰椎間盤突出是腰腿痛最常見的原因之一。機(jī)械壓迫是導(dǎo)致疼痛的直接因素，然而在臨床工作中我們有時會發(fā)現(xiàn)患者的臨床表現(xiàn)與影像學(xué)檢查不符，突出的程度及其對神經(jīng)根的壓迫程度與臨床癥狀不相一致，手術(shù)中發(fā)現(xiàn)神經(jīng)根充血水腫，類似炎癥樣改變。所以，僅用機(jī)械壓迫因素來解釋腰腿痛的發(fā)病機(jī)制還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，炎癥因素在椎間盤退變中的作用越來越引起大家的關(guān)注。這一事實也說明，目前椎間盤退變性疾病的治療仍存在許多問題，

2、需要繼續(xù)深入地研究和探索。近幾年來，有人報道在退變椎間盤中發(fā)現(xiàn)炎癥細(xì)胞因子，故推測椎間盤退變與致炎因子密切相關(guān)。但是，這些炎癥細(xì)胞因子在椎間盤退變中的確切作用還不清楚。
　　 目的：通過對人髓核細(xì)胞體外培養(yǎng)，觀察炎癥因子白細(xì)胞介素-6(IL-6)對髓核細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)及基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑-1(TIMP-1)表達(dá)的影響，以期進(jìn)一步闡明IL-6介導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白酶在椎間盤細(xì)胞退行性變中的病理機(jī)制，從而為椎間盤

3、退變的防治提供一定的理論依據(jù)。
　　 方法：1、分離并消化人椎間盤髓核組織得到單個細(xì)胞并完成原代細(xì)胞接種培養(yǎng)。2、采用HE染色法定時于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、增殖的變化，采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測Ⅱ型膠原的表達(dá)情況。3、在原代細(xì)胞融合傳代至第三代后建立空白對照組與實驗組(施加10μg/L,100μg/L,1000μg/L不同濃度白細(xì)胞介素-6刺激細(xì)胞生長。4、采用逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法測定各組髓核細(xì)胞MM

4、P-3及TIMP-1 mRNA的表達(dá)變化。5、經(jīng)統(tǒng)計軟件分析得出結(jié)論。
　　 結(jié)果：1、在倒置相差顯微鏡下連續(xù)觀察，10天后95％以上的細(xì)胞貼壁，原代細(xì)胞多為梭形，有偽足伸出；經(jīng)胰酶消化傳代后，細(xì)胞貼壁生長速度加快。2、HE染色細(xì)胞多為梭形，有偽足伸出，細(xì)胞核為圓形或橢圓形，胞漿內(nèi)可見較多空泡；Ⅱ型膠原免疫細(xì)胞化學(xué)染色呈現(xiàn)陽性結(jié)果。3、應(yīng)用不同濃度的IL-6(0、10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml)刺激體外培養(yǎng)

5、的人髓核細(xì)胞，共同培養(yǎng)72h后收集細(xì)胞。應(yīng)用RT-PCR方法檢測MMP-3和TIMP-1的表達(dá)情況，經(jīng)過方差分析檢驗可知，F(xiàn)值分別為26.360、86.790，P值均等于0.000，說明四組之間比較差異具有顯著性。在不同劑量IL-6的刺激下，MMP-3的表達(dá)量在實驗劑量范圍內(nèi)隨著IL-6的劑量加大而呈上升趨勢，TIMP-1的表達(dá)量在實驗劑量范圍內(nèi)隨著IL-6的劑量加大而呈下降趨勢。四組之間兩兩比較得出，對照組、10μg/L組、100μg