1、目前，肝移植已成為治療終末期肝臟疾病的唯一有效手段,急慢性排斥反應(yīng)仍是臨床器官移植中難以克服的問題。長期應(yīng)用免疫抑制劑已經(jīng)帶來許多致命的副作用。為減少免疫抑制劑的使用劑量和時間,降低毒副作用并延長移植受體的存活時間,國內(nèi)外學(xué)者作了大量實(shí)驗研究。本實(shí)驗擬通過轉(zhuǎn)基因技術(shù),將PAG(T細(xì)胞活化的關(guān)鍵的負(fù)性調(diào)節(jié)蛋白)的編碼基因用納米材料PEG-PEI共聚物,并負(fù)載超順磁性氧化鐵(SPIO)包裹,在CD3抗體的介導(dǎo)下,導(dǎo)入到T細(xì)胞內(nèi)并表達(dá),在體外

2、及體內(nèi)實(shí)驗上觀察PAG的負(fù)性調(diào)節(jié)蛋白作用,以期延長大鼠原位肝移植存活,并為誘導(dǎo)免疫耐受及臨床器官移植提供理論依據(jù)。 1.探討了大鼠PAG蛋白真核質(zhì)粒的構(gòu)建。將PAG蛋白克隆基因片斷,經(jīng)定向插入到空載體pcdna3.1-(-)-C-3xflag和pcmv-3xflag-N中,成功的構(gòu)建了大鼠PAG蛋白高表達(dá)的真核質(zhì)粒,為研究PAG在體外細(xì)胞、體內(nèi)肝移植模型上移植免疫排斥,打下實(shí)驗基礎(chǔ)。 2.運(yùn)用納米材料PEG-PEI共聚物