1、南華大學(xué)碩士學(xué)位論文腫瘤抑制基因啟動(dòng)子甲基化及轉(zhuǎn)錄表達(dá)與肺癌相關(guān)性研究姓名：余宗濤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：袁亞莉200705014中文摘要肺癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，近年來(lái)肺癌發(fā)病率、死亡率在世界范圍內(nèi)均有較大幅度的增長(zhǎng)，究其原因是因?yàn)槿藗儗?duì)肺癌的發(fā)病機(jī)制尚未徹底了解，缺乏有效的防治措施。因此，徹底揭示肺癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，以便對(duì)其進(jìn)行有效的早期預(yù)警、早期診斷、早期防治顯得尤為重要。研究資料表明：DNA甲

2、基化機(jī)制參與了腫瘤的發(fā)生。甲基化是指DNA在甲基轉(zhuǎn)移酶催化下，將甲基基團(tuán)CH3加到胞嘧啶環(huán)的第5碳原子上形成5甲基胞嘧啶（5mC），多發(fā)生于基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島。真核細(xì)胞的DNA甲基化是抑制基因活性的一種重要機(jī)制，其改變了蛋白和DNA的相互作用，導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)的改變，降低基因的轉(zhuǎn)錄。并且有證據(jù)提示DNA甲基化發(fā)生在細(xì)胞惡變之前，因此檢測(cè)DNA啟動(dòng)子區(qū)是否發(fā)生了高甲基化有助于早期發(fā)現(xiàn)突變細(xì)胞。脆性組氨酸三聯(lián)體基因(Fragilehisti

3、dinetraidFHIT)是1996年由Ohta等用定位克隆技術(shù)及外顯子捕獲法在3p14.2發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因。在人類肺癌、胃腸道癌、乳腺癌等多種實(shí)體瘤中都存在FHIT基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物及蛋白表達(dá)的缺失。但FHIT基因的失活機(jī)制不同于經(jīng)典的抑癌基因，其在大多數(shù)腫瘤中只出現(xiàn)純合子或雜合子的缺失，只有極少數(shù)腫瘤可檢測(cè)到點(diǎn)突變，因此人們將研究目光轉(zhuǎn)向FHIT基因啟動(dòng)子甲基化區(qū)域，但國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中關(guān)于FHIT基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與肺癌關(guān)系的研究則較少。

4、RASSF1A(Rasassociationdomainfamily1A)基因，是最近克隆出的一種基因，定位于3p21.3。RASSFIA在多種人類腫瘤中因其啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化而發(fā)生表達(dá)失活。在RASSFIA基因敲除的小鼠傾向于易自然發(fā)生腫瘤，隨著年齡增長(zhǎng)，更易患肺腺癌及惡性血液性疾病。盡管對(duì)RASSF1A功能沒(méi)有完全清楚，但已證明其參與細(xì)胞凋亡，微管穩(wěn)定及有絲分裂的調(diào)節(jié)。PTEN(phosphatasetensinhomology

5、donchromosometen張力蛋白同源的磷酸酶基因)是1997年發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，具有與磷酸酶、彈力蛋白同源序列，是雙重特異性磷酸酶。PTEN的功能包括：拮抗PI3K的作用，對(duì)細(xì)胞起增殖負(fù)調(diào)控作用；PTEN抑制細(xì)胞遷移、鋪展和局部粘附；PTEN可以顯著下調(diào)MMPs、IGFs、VEGF的表達(dá)。PTEN活性的改變與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)系。PTEN表達(dá)缺失的機(jī)制包括PTEN基因突變和啟動(dòng)子甲基化，PTEN突變可見于罕見的