GOLPH2的糖基化修飾對于其參與肝癌發(fā)生的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：
　　本研究通過轉(zhuǎn)染GOLPH2及其糖基化缺失的重組質(zhì)粒進入肝癌細胞HepG2,進行體外功能學(xué)研究(細胞生長與細胞周期)，探索GOLPH2的糖基化修飾對肝癌細胞的炎癥通路及膽固醇代謝通路的影響，從而揭示GOLPH2的糖基化修飾對于其功能發(fā)揮的影響。
　　方法：
　　構(gòu)建GOLPH2的109、144位糖基化位點雙突變質(zhì)粒，并命名為pcDNA3-Flag-GOLPH2(DM)，用脂質(zhì)體分別轉(zhuǎn)染GOLPH2 WT(野生

2、型GOLPH2重組質(zhì)粒)或者DM到肝癌細胞HepG2中，進行細胞生長與細胞周期實驗、NF-κB報告基因?qū)嶒?、炎癥小體及脂筏的免疫熒光染色實驗。
　　結(jié)果：
　　細胞生長與細胞周期實驗表明，與野生型GOLPH2相比，糖基化位點突變GOLPH2會使細胞生長與細胞周期減慢。雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灲Y(jié)果表明，野生型GOLPH2能夠激活HepG2細胞中NF-κB的轉(zhuǎn)錄活性，而雙糖基化位點突變會使GOLPH2失去此激活作用。免疫熒光實驗檢

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