1、目的:脂肪源性干細(xì)胞(Adipose-derived stem cells，ADSCs)可以向成骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等分化。脂肪干細(xì)胞由于具備易于獲取等特點(diǎn)，在組織工程中比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有更加廣闊的應(yīng)用前景，并因此成為當(dāng)今的研究熱點(diǎn)之一。脂肪源性干細(xì)胞與間充質(zhì)干細(xì)胞不但具有非常近似的生物學(xué)性質(zhì)，而且在細(xì)胞表面標(biāo)志譜的表達(dá)方面也十分接近。觀察脂肪干細(xì)胞的生長規(guī)律，鑒定其干細(xì)胞特性和免疫學(xué)性質(zhì)。探索脂肪源性干

2、細(xì)胞表面白細(xì)胞抗原Ⅱ類分子的表達(dá)以及其免疫原性和免疫調(diào)節(jié)作用，并探討其具體機(jī)制是通過什么途徑誘導(dǎo)的。
　　方法:分離培養(yǎng)脂肪源性干細(xì)胞，并用γ型干擾素刺激，然后用流式細(xì)胞術(shù)檢測其表面免疫分子白細(xì)胞抗原Ⅱ的表達(dá)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western bolt分別檢測吲哚胺-2，3-雙加氧酶基因(Indoleamine2，3-dioxygenase，IDO)和蛋白的表達(dá)。脂肪源性干細(xì)胞單向刺激淋巴細(xì)胞，觀察細(xì)胞增殖情況。淋巴細(xì)胞用植物血

3、凝素(phytohaemagglutinin，PHA)刺激后，加入1×102-1×105脂肪源性干細(xì)胞，觀察淋巴細(xì)胞增殖情況;同時(shí)，1×102-1×105脂肪源性干細(xì)胞作為“第三者”細(xì)胞加入混合雙向淋巴細(xì)胞反應(yīng)體系中，同樣觀察淋巴細(xì)胞增殖情況。
　　結(jié)果:所獲脂肪干細(xì)胞具有很強(qiáng)的體外增殖能力，其生長曲線呈“S”形;第3代脂肪干細(xì)胞表面CD29、CD44、CD90以及主要組織相容性抗原Ⅰ呈陽性表達(dá)，CD31、CD45、CD34及主要

4、組織相容性抗原Ⅱ呈陰性表達(dá);未發(fā)現(xiàn)異體脂肪干細(xì)胞刺激淋巴細(xì)胞增殖。脂肪干細(xì)胞低表達(dá)白細(xì)胞抗原Ⅱ和吲哚胺-2，3-雙加氧酶，但在γ型干擾素IFN-γ刺激后，白細(xì)胞抗原Ⅱ和吲哚胺-2，3-雙加氧酶表達(dá)均明顯上調(diào)。脂肪源性干細(xì)胞不能刺激淋巴細(xì)胞增殖，但能抑制植物血凝素或異體淋巴細(xì)胞導(dǎo)致的淋巴細(xì)胞增殖，且脂肪源性干細(xì)胞與混合淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)的上清中檢測到大量γ型干擾素的表達(dá)。
　　結(jié)論:提示所獲得細(xì)胞為脂肪干細(xì)胞，且具有較弱的排斥反應(yīng)，有可