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![蟲(chóng)草菌誘導(dǎo)柞蠶蛹產(chǎn)生抗菌物質(zhì)的分離純化和抑菌活性研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/cef0f12f-59e2-428e-af1f-f04e267b526a/cef0f12f-59e2-428e-af1f-f04e267b526a1.gif)
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1、本文以鱗翅目昆蟲(chóng)柞蠶(A.pernyi)滯育蛹和蟲(chóng)草真菌(C.militaris)為試驗(yàn)材料,對(duì)利用柞蠶滯育蛹人工培養(yǎng)柞蠶蛹蟲(chóng)草的條件、培育出的柞蠶蛹蟲(chóng)草及誘導(dǎo)后柞蠶蛹中的抗菌物質(zhì)進(jìn)行了分離、純化,并對(duì)其抗菌物質(zhì)的活性以及誘導(dǎo)后蟲(chóng)體的生理生化指標(biāo)的變化等方面進(jìn)行了研究,結(jié)果表明: 1.人工培養(yǎng)柞蠶蛹蟲(chóng)草的關(guān)鍵階段為光照培養(yǎng)以后,最佳溫度、濕度、光照和pH值分別為22±2℃,80%,10h/d,pH5~7。 2.柞蠶蛹蟲(chóng)草
2、經(jīng)過(guò)水提、醇沉、去蛋白、去離子、脫色后,粗多糖的得率為2.611%,抑菌試驗(yàn)表明,該多糖對(duì)供試的金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和蘇云金芽孢桿菌有著非常明顯的抑制作用;對(duì)柞蠶鏈球菌抑制作用稍弱,與前三者之間呈顯著差異(P<0.05);對(duì)大腸桿菌和乳酸桿菌作用不明顯;對(duì)供試真菌均沒(méi)有抑制作用。 3.蟲(chóng)草菌誘導(dǎo)柞蠶蛹后血淋巴抑菌活性在3~4d達(dá)到最大值,對(duì)大部分供試細(xì)菌、真菌有作用。對(duì)其中的金黃色葡萄球菌和柞蠶鏈球菌的抑菌活性與對(duì)其它供試真
3、菌、細(xì)菌的抑菌活性有顯著差異(P<0.05);其次為乳酸桿菌;再次為大腸桿菌、小麥赤霉、煙草赤星、水稻惡苗、葡萄白腐、玉米小斑、番茄早疫病菌;然后為玉米彎孢和柞蠶白僵病菌;對(duì)其他供試菌株無(wú)作用。 大腸桿菌、柞蠶鏈球菌誘導(dǎo)柞蠶蛹后的同期血淋巴與蟲(chóng)草菌相比抑菌活性差別不明顯;但經(jīng)二者誘導(dǎo)柞蠶蛹提取液抑菌活性在蠶蛹死亡后逐漸減弱,直至消失;經(jīng)蟲(chóng)草菌誘導(dǎo)柞蠶蛹硬化后提取液抑菌譜較硬化前發(fā)生變化,即:對(duì)蘇云金芽孢桿菌的活性增強(qiáng);對(duì)柞蠶鏈球
4、菌的抑制作用減弱;對(duì)大腸桿菌、乳酸桿菌和供試真菌無(wú)明顯抑菌作用;對(duì)原來(lái)沒(méi)有作用的枯草桿菌產(chǎn)生明顯的抑制作用。 4.對(duì)蟲(chóng)草菌誘導(dǎo)柞蠶蛹后的血淋巴,依次經(jīng)過(guò)SephadexG-50、SephadexG-100凝膠過(guò)濾層析,CM-Sepharose Fast Flow陽(yáng)離子交換層析,對(duì)其進(jìn)行Tricine-SDS.PAGE電泳,得到分子量約為3kDa的抗菌肽。用抑菌圈法檢測(cè)抑菌活性,發(fā)現(xiàn)分離純化后得到的物質(zhì)對(duì)供試的大部分細(xì)菌、真菌有明
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