1、[目的]為探討α-硫辛酸(ALA)對(duì)高糖刺激的人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)炎癥因子分泌的影響,本研究選取從健康志愿者提取的PBMC為研究對(duì)象,觀察在高糖刺激下PBMC引起單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)、細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)表達(dá)的變化;再用ALA進(jìn)行干預(yù)并觀察其抑制MCP-1和ICAM-1分泌的作用,為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)ALA在糖尿病慢性并發(fā)癥的防治作用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù). [方法](1)取健康志愿者外周血,經(jīng)淋巴細(xì)胞

2、分離液(Ficoll液)分離其單個(gè)核細(xì)胞并用RMPI-1640培養(yǎng)液配成適當(dāng)濃度的單個(gè)核細(xì)胞懸液.(2)設(shè)正常糖組(5.5 nlmol/L,NG),高滲組(5.5mmol/L葡萄糖+19.5mmol/L甘露醇,HS),高糖組(25mmol/L,HG)和ALA干預(yù)組;干預(yù)組中ALA分三種不同濃度(LAso,LA<,100>,LA<,250>,為分別含α-硫辛酸50、100、250μmol/L).各組分別與PBMC共同培養(yǎng)24、48 h.(

3、3)收集24、48h細(xì)胞培養(yǎng)上清液,采用ELISA方法檢測(cè)上清液中MCP-1、ICAM-1的濃度. [結(jié)果] (1)在實(shí)驗(yàn)的48h內(nèi)高糖可刺激外周血單個(gè)核細(xì)胞MCP-1的合成P<0.01),在24h時(shí)高糖刺激下MCP-1的合成達(dá)到高峰,而滲透壓對(duì)MCP-1合成無影響. (2)培養(yǎng)24h,低濃度ALA(50,100μmol/L)對(duì)高糖誘導(dǎo)下MCP-1的合成無影響(P>0.05).而培養(yǎng)至48h時(shí),LA<,100>,LA<,

4、250>干預(yù)組可明顯抑制MCP-1的合成. (3)高糖刺激24h時(shí),HG組上清液中ICAM-1的濃度較NG組明顯升高(P<0.01),培養(yǎng)至48小時(shí)ICAM-1的分泌仍有增加,但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),滲透壓同樣對(duì)ICAM-1合成無明顯影響. (4)LA<,100>,LA<,250>干預(yù)組ICAM-1的濃度明顯低于HG組,但此兩組在24h、48h時(shí)間點(diǎn)上ICAM-1濃度無差異(P>0.05).LA<,50>組與