1、子宮內膜異位癥(endometriosis，異位癥)是由具有生長功能的異位子宮內膜所致，異位子宮內膜可以侵犯全身任何部位，但多數(shù)位于盆腔內。生育年齡婦女是異位癥高發(fā)人群，生育少、生育晚的女性發(fā)病明顯多于多生育者，所以，中國近年來異位癥發(fā)生率呈上升趨勢。異位癥是良性病變，但具有類似惡性腫瘤的種植侵蝕及遠處轉移能力，患者呈持續(xù)加重的盆腔粘連、疼痛、不孕，而其發(fā)病機制尚不明確，異位癥早期特異性診斷方法的缺乏、治療的不徹底性、異位癥帶來的不良后

2、果等都是患者及婦科醫(yī)生困惑問題。 異位子宮內膜隨卵巢激素變化而發(fā)生周期性出血，導致周圍纖維組織增生和囊腫粘連形成是異位癥的基本病理變化。子宮內膜腺體、子宮內膜間質等典型組織結構因此隨病情發(fā)展而難以發(fā)現(xiàn)，典型的病理所見并非異位癥診斷金標準，而且多數(shù)學者接受的子宮內膜種植學說說明生育年齡婦女隨月經(jīng)周期經(jīng)血逆流，不斷發(fā)生新的子宮內膜細胞種植，使異位病灶內膜細胞發(fā)展存在不同步現(xiàn)象，這種病理特點使異位癥分子水平研究結論差異較大、爭議較多。

3、異位癥動物模型的建立成為許多學者解決這一問題的主要手段。裸鼠以其遺傳背景明確、穩(wěn)定，不發(fā)生免疫排斥反應，可以保持移植病變固有形態(tài)和生物學特性等優(yōu)勢，被國外學者廣泛應用于異位癥動物模型的建立，獲得成功。但國內始終未見相關報道。 異位癥是與遺傳、免疫等多因素相關的多因子疾病，國內外學者進行了許多相關研究，但始終未發(fā)現(xiàn)異位癥特異性靶標。而異位癥特異性靶標的研究正是解決早期診斷異位癥的主要途徑。異位內膜細胞粘附、新血管生成、侵襲生長是異

4、位病灶發(fā)生的基礎，相關細胞因子的作用得到廣泛研究，獲得相對統(tǒng)一的研究結論，即CAMs、VEGF、MMP等細胞因子在異位癥的發(fā)生和/或發(fā)展中起上調作用，但這些細胞因子在異位癥中的作用與在惡性腫瘤中的作用相似，缺乏特異性。EG-VEGF是近年美國學者發(fā)現(xiàn)的特異性血管形成有絲分裂因子，它與VEGF功能相似，結構卻不同，其特點是它特異性表達于甾體激素內分泌器官，并可能在該類器官增殖病變的新血管生成中起重要作用。EG-VEGF在異位癥中的特異性作

5、用尚未見報道，但其高度組織特異性的特征將引起廣大學者的廣泛關注。 芳香化酶是雌激素合成的限速酶，它不僅以內分泌機制影響體循環(huán)中雌激素合成，而且以自分泌和旁分泌機制影響局部雌激素的合成。異位癥是雌激素依賴性疾病，異位癥根治術后仍然存在復發(fā)機率、個別異位癥患者絕經(jīng)后病變繼續(xù)發(fā)展等現(xiàn)象證明異位病灶可能存在局部雌激素作用，所以，芳香化酶在異位癥在位內膜及異位內膜的表達及其在異位癥發(fā)病機理中的作用受到學者們關注。 該課題旨在研究異

6、位癥裸鼠模型的建立及相關生物學研究。并從分子水平研究EG-VEGF在異位癥發(fā)病機理中特異性作用。依據(jù)芳香化酶在雌激素合成中的關鍵作用，研究芳香化酶在異位癥的在位內膜及異位內膜中特異性表達，為探索異位癥早期診斷途徑提供新思路。 方法: 選擇異位癥患者和非異位癥患者各24例，手術切除子宮中獲取分泌晚期子宮內膜，隨機種植于雌性裸鼠盆腹腔內，雌激素支持，分別于5天、15天、30天處死裸鼠，觀察裸鼠異位病灶生長情況，同時，種植大網(wǎng)

7、膜組織做對照觀察。另通過手術中獲取子宮內膜異位囊腫壁30例(Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期各15例)及正常對照卵巢組織15例。通過光鏡及透視電鏡觀察異位病灶組織學變化。采用RT-PCR方法檢測：EG-VEGFmRNA在裸鼠異位病灶及人在位內膜、在子宮內膜異位囊腫壁及卵巢中的表達及相互關系；芳香化酶mRNA在裸鼠異位病灶及人在位內膜中的表達；VEGF及MMP-9mNRA在裸鼠異位病灶及人在位內膜的表達。采用原位雜交法檢測EG-VEGFmRNA在裸鼠異

8、位病灶及人在位內膜中的表達部位及程度。免疫組化法檢測裸鼠異位病灶及人在位內膜雌、孕激素受體表達及芳香化酶蛋白表達。 結果: 研究結果顯示，人子宮內膜置入裸鼠盆腹腔后，全部種植生長，以腹壁、膀胱旁脂肪為主要生長部位。5天異位病灶即與裸鼠組織牢固粘附，新血管形成。15天病灶變硬，與裸鼠組織呈融合生長，周圍粘連。30天病灶萎縮變小，局部粘連較重。光鏡下，腺細胞呈立方形或扁平狀，血供豐富，腺細胞、間質細胞、炎細胞及裸鼠脂肪細胞等

9、混合存在。越晚期纖維化越重。電鏡下，5天腺細胞纖毛變短，細胞器清晰可見；15天腺細胞核膜皺縮，細胞器不完整；30天細胞器消失，染色質聚集，但仍可見分泌顆粒。異位癥及非異位癥內膜種植的異位病灶形態(tài)學及組織學均無差異。 異位癥與非異位癥在位內膜比較，EG-VEGF、VEGF、MMP-9及芳香化酶mRNA相對表達含量無顯著差異(P＞0.05)，異位癥組在位內膜芳香化酶mRNA陽性表達率明顯高于非異位癥組在位內膜。與相應在位內膜比較，裸

10、鼠異位病灶EG-VEGF、VEGF、MMP-9及芳香化酶mRNA相對表達含量均明顯增強(P＜0.05)，其中，EG-VEGFmRNA15天組表達最強，與30天組比較，P＜0.05；VEGF、MMP-9mRNA15天組與5天、30天組比較，均P＜0.05；芳香化酶mRNA5天、15天、30天各組表達無顯著差異，P＞0.05。在子宮內膜異位囊腫中，Ⅰ～Ⅱ期組與Ⅲ～Ⅳ期組比較，EG-VEGF/VEGFmRNA表達均明顯增強，P＜0.05。

11、 EG-VEGFmRNA雜交信號主要分布于腺體細胞、間質細胞胞漿中，裸鼠異位病灶中，5天、15天組以強陽性表達為主，30天組及在位內膜以弱陽性表達為主。中、早期異位病灶(5天組+15天組)陽性表達率高于晚期(30天組)異位病灶及在位內膜，P＜0.05。在子宮內膜異位囊腫中，早期陽性表達率明顯強于晚期，P＜0.05，Ⅰ～Ⅱ期以強陽性表達為主(10/13)，Ⅲ～Ⅳ期以弱陽性表達為主(6/9)。 裸鼠異位病灶中，免疫組化法檢測雌、

12、孕激素受體(ER、PR)，5天、15天組陽性表達率明顯高于30天組，P＜0.05，以弱陽性表達為主。異位癥組與非異位癥組異位病灶ER、PR表達無差異。異位癥組在位內膜芳香化酶蛋白陽性表達率(91.67％)高于非異位癥組在位內膜(70.83％)，P＜0.05。異位癥組裸鼠異位病灶芳香化酶陽性表達率(91.67％)與在位內膜比較，無顯著差異，P＞0.05；非異位癥組異位病灶芳香化酶蛋白陽性表達率(95.83％)與在位內膜比較，差異顯著，P＜

13、0.05。 結論: 1.該研究結果表明，建立子宮內膜異位癥裸鼠模型，用于異位癥基礎及臨床研究，方法簡便，其形態(tài)學、組織學及生物學變化規(guī)律與人異位癥相似。異位癥早期、中期血管生成及侵襲能力強于晚期病變，晚期異位癥發(fā)展機制可能更復雜。異位癥及非異位癥在位內膜種植的異位病灶，形態(tài)學及組織學變化無明顯差異。 2.EG-VEGF基因作為甾體激素內分泌器官特異性血管形成有絲分裂因子，在雌激素靶組織—子宮內膜的腺體及間質中也表