1、水貂病毒性腸炎（Mink parvoviral enteritis），是由水貂腸炎細小病毒（Mink enteritis virus MEV）引起的高度接觸性傳染病，發(fā)病水貂的主要臨床特征為劇烈腹瀉和嘔吐等，該病具有較高的發(fā)病率和死亡率。隨著毛皮動物養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，此病也時常爆發(fā)，給水貂養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經濟損失。因此研究水貂腸炎病毒的致病性和免疫相關因子變化對MEV的預防具有重要作用。
　　為檢測水貂IFN-α、IFN-β和IF

2、N-γmRNA，建立了熒光定量RT-PCR檢測方法，根據GenBank設計引物，通過RT-PCR擴增IFN-α、IFN-β、IFN-γ和GAPDH基因片段，連接到pMD18-T載體中制備質粒標準品，建立了相應基因mRNA的熒光定量RT-PCR檢測方法并建立標準曲線。結果表明：GAPDH、IFN-α和 IFN-β和 IFN-γ基因的 Ct值與標準品稀釋度在1×101copies/μL～1×107copies/μL內均呈良好的線性關系，相關

3、系數（R2）均為1.00，熔解曲線均呈單一熔解峰，檢測下限為10copies/μL，重復性試驗結果表明組內、組間變異系數均小于4.5％。臨床樣品檢測結果表明水貂感染腸炎病毒后，IFN-α、IFN-β和IFNγ相對表達水平均在6d達到最高峰值，IFN-α相對表達量要比IFN-β和IFN-γ相對表達量高，并且在感染期（4d～6d）IFN-α相對表達量明顯上調。本研究為水貂IFN mRNA的定量分析提供了有效工具。
　　為研究水貂腸炎病

4、毒強毒株SMPV-11和弱毒疫苗株MEVB-F61分別感染水貂后，水貂細胞因子的動態(tài)變化，現采用已建立并應用的SYBR GreenⅠ染料法熒光定量RT-PCR檢測方法，檢測不同MEV（SMPV-11和MEVB-F61）感染水貂后，水貂細胞因子的動態(tài)變化。檢測結果表明：在感染SMPV-11和MEVB-F61病毒后，IFN-α、IFN-β、INF-γ和IL-4相對表達量在2d～6d逐漸升高，并且在第6d達到峰值；并且IFN-α、IFN-β、

5、INF-γ和IL-4在10d和15d SMPV-11組的表達量均高于MEVB-F61組；TNF-α的相對表達量與前三者有所差異，在0d～2d mRNA表達量逐漸升高，第2d達到最高值后逐漸下降，在第6d又開始逐漸升高，并且SMPV-11組的表達量也高于MEVB-F61組。本研究為MEV感染水貂后機體外周血細胞因子動態(tài)變化的研究提供理論基礎。
　　為了研究水貂腸炎病毒感染水貂后病毒在水貂體內的分布情況，設計了兩個試驗，首先研究水貂細

6、小病毒強毒株SMPV-11口服感染水貂后的病理變化、白細胞變化和病毒在體內不同器官分布情況等；同時另一個試驗研究了弱毒疫苗株MEVB-F61注射感染水貂后的病毒在體內不同器官分布規(guī)律、白細胞變化。結果表明，SMPV-11感染后，水貂表現出嚴重的臨床特征，如食欲廢絕、體溫升高及血便等癥狀，剖檢可見腸系膜淋巴結、脾臟和肝臟腫大有出血點、腸道出血和腸壁變薄等癥狀，感染24h后，在各組織臟器中可以檢測到病毒，并且在4d～6d MEV載量維持較高

7、水平。MEVB-F61感染后，未發(fā)現主要的臨床癥狀，剖檢未見明顯的病理變化特征，病毒載量檢測顯示，在腦、腎臟和肺臟中未檢測到MEV的存在，而且在其它組織中，病毒載量均較低，在第15d心、肝和腸道等臟器中已檢測不到MEV。在4d～8d是SMPV-11組和MEVB-F61水貂的排毒量高峰時段，表明此時段是病毒向外界擴散最嚴重時期，并且兩個毒株在腸道和淋巴組織和脾臟中含量最高，印證了腸道、腸系膜淋巴結和脾臟等是MEV主要的靶器官。對MEV在臨