1、目的:近來越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，維生素D可以通過增強糖皮質(zhì)激素抗炎效應(yīng)或逆轉(zhuǎn)激素抵抗作用來治療哮喘。一旦涉及到補充維生素D，其補充劑量便是最關(guān)心的問題。目前補充維生素D的劑量以及其不同濃度產(chǎn)生的不同效應(yīng)方面尚無統(tǒng)一標準，因此，本試驗探尋能協(xié)同甲強龍最大限度發(fā)揮抗炎作用的維生素D補充劑量，為維生素D應(yīng)用于治療和預防哮喘，增強糖皮質(zhì)激素的敏感性，降低糖皮質(zhì)激素的用量提供依據(jù)。
　　方法:將4-5周BALB/C雌性小鼠40只隨機分為5組:

2、空白對照組(A)、哮喘組(B)、甲強龍組(C)、低劑量1，25(OH)2D3聯(lián)合甲強龍組(D)、高劑量1，25(OH)2D3聯(lián)合甲強龍組(E)，每組8只。B、C、D、E、組分別用卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)溶液腹腔注射致敏與OVA霧化吸入激發(fā)，C、D、E組激發(fā)前1h分別予以5mg/kg的標準腹腔注射甲強龍干預，低劑量1，25(OH)2D3聯(lián)合甲強龍組(D)激發(fā)前1h以5ug/kg的標準腹腔注射1，25(OH)2D3(等同于我國

3、維生素D每日推薦攝入量(RNI)400IU)干預，高劑量1，25(OH)2D3聯(lián)合甲強龍組(E)激發(fā)前1h以10ug/kg的標準腹腔注射1，25(OH)2D3(等同于我國維生素D每日推薦攝入量(RNI)的兩倍）干預。A組予以等劑量0.9％生理鹽水腹腔注射和霧化吸入。最后1次激發(fā)后24 h，測定各小鼠氣道反應(yīng)性后處死小鼠，行肺泡灌洗液細胞計數(shù)及肺組織蘇木精一伊紅(H—E)染色觀察各組小鼠氣道炎癥情況。用免疫印跡法(Western blot

4、)檢測各組小鼠肺組織勻漿液MKP-1(Mitogen-activated protein kinase phosphatase-1，絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1)的表達，酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測各組小鼠血清IL-10、趨化因子FKN(fractalkine)的含量。
　　結(jié)果:1:經(jīng)1，25(OH)2D3干預后的D組、E組分別與哮喘組、甲強龍組比較，增強呼氣間歇值(Penh)明顯降低（P＜0.05）;小鼠血清IL-10的含量顯著升高

5、（P＜0.05）;趨化因子FKN(fractalkine)的含量顯著降低（P＜0.05）;肺組織勻漿液MKP-1的表達水平明顯上調(diào)（P＜0.05）;肺泡灌洗液中細胞總數(shù)和嗜酸性粒細胞數(shù)(Eosinophils，EOS)比例降低明顯（P＜0.05);肺組織切片顯示支氣管嗜酸性粒細胞浸潤以及粘膜充血水腫、炎癥較輕，組織結(jié)構(gòu)形態(tài)學上未見明顯肺泡結(jié)構(gòu)破壞、肺泡增厚及肺泡間質(zhì)纖維化。模型組肺組織炎癥最重，支氣管粘膜見大量嗜酸性粒細胞及中性粒細胞浸

6、潤，肺泡腔內(nèi)有大量壞死滲出物，纖毛倒伏脫落，上皮細胞壞死，甲強龍組病理變化介于兩者之間。D組與E組氣道增強呼氣間歇值(Penh)、血清IL-10、FKN(fractalkine)的含量及肺組織勻漿液MKP-1的表達水平及肺泡灌洗液細胞數(shù)之間差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），肺組織切片炎癥均較輕微，兩組之間無明顯差異。
　　結(jié)論:高劑量1，25(OH)2D3與低劑量1，25(OH)2D3均能通過上調(diào)MKP-1、IL-10的表達，降