1、保證基因庫中種質(zhì)資源的安全保存和科學更新，確保種質(zhì)在貯藏及更新過程中維持其遺傳完整性是種質(zhì)安全保存研究的最核心課題。因此開展基因庫異質(zhì)種質(zhì)材料遺傳完整性變化影響因素的研究具有非常重要的現(xiàn)實意義。本研究選用不同老化程度、不同更新發(fā)芽率水平和不同繁殖世代數(shù)的棉花種子為材料，應用cDNA-AFLP技術(shù)來分析種子老化造成的棉花種質(zhì)基因差異表達，進而分析種子老化的機理，以及利用SRAP分子標記技術(shù)和SSR分子標記技術(shù)研究常異花授粉作物種質(zhì)資源在更

2、新過程中，不同更新發(fā)芽率水平和不同繁殖世代數(shù)的老化棉花種質(zhì)遺傳完整性的變化情況，為制定棉花種質(zhì)更新時的發(fā)芽率標準和繁殖方法提供實踐依據(jù)，也為其它常異花授粉作物的更新提供參考，以確保常異花授粉作物種質(zhì)資源世代安全更新，為基因庫貯存種質(zhì)發(fā)芽率更新標準和最佳繁殖更新方法的制定提供科學的理論和實踐依據(jù)。主要結(jié)論如下： 1．利用cDNA-AFLP技術(shù)分析老化棉花種子的基因差異表達，根據(jù)帶型可將得到的差異片段分為5個類型，分別回收、克隆7個

3、差異片段并利用BLASTN和BLASTX程序與網(wǎng)上數(shù)據(jù)庫(NCBI，National Center for Biotechnology In：formation)進行同源性分析。其中一條在對照、老化16周、28周種子共有的片段與歐洲板栗(Castaneasativa)核糖體蛋白L33和擬南芥(Arabidopsis thaliana)核糖體結(jié)構(gòu)組分蛋白具有同源性；對照種子特有的一條片段與擬南芥(Arabidopsis thaliana)

4、中氧化還原酶和水稻(Oryza sativa)2-硝基丙烷雙加氧酶相關(guān)蛋白具有同源性；在老化36周種子特有的4條片段中：1條與水稻中被公認的三肽基酶II蛋白具有同源性，而其他3條的同源序列功能不詳；此外，老化16周種子特有的一條片段無明顯同源序列。 2．利用SRAP和SSR分子標記檢測29份棉花種質(zhì)遺傳完整性。結(jié)果表明，無論每一份不同更新發(fā)芽率水平繁殖后代的種質(zhì)之間，還是每一份不同繁殖世代數(shù)種質(zhì)之間，其等位基因頻率差異不顯著，也