1、[研究背景]鮑曼不動桿菌已成為引起嚴(yán)重致死性院內(nèi)感染重要病原菌，常表現(xiàn)為對多種抗菌藥物耐藥即多重耐藥，易引起醫(yī)院獲得性肺炎、菌血癥、泌尿系統(tǒng)感染、腦膜炎、軟組織感染以及腹腔內(nèi)感染等嚴(yán)重感染。特別是近年國內(nèi)外報道耐碳青霉烯類多重耐藥鮑曼不動桿菌，在重癥監(jiān)護病房、血液病房引起爆發(fā)流行，病死率高。鮑曼不動桿菌感染治療越來越困難，臨床治療面臨著嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。因此加強對其耐藥性監(jiān)測，研究其耐藥分子機制，對于控制和治療鮑曼不動桿菌引起的醫(yī)院內(nèi)感染具有

2、重要的現(xiàn)實意義。 [目的]篩選分離鮑曼不動桿菌臨床菌中多重耐藥菌株，測定其耐藥表型及耐藥模式；以氟喹諾酮類和氨基糖苷類為代表測定外排泵抑制劑對抗菌藥物對鮑曼不動桿菌抗菌活性的影響；研究臨床分離鮑曼不動桿菌中外排泵基因表達情況；測定鮑曼不動桿菌外膜蛋白，分析其與鮑曼不動桿菌多重耐藥性的關(guān)系。 [方法] (1)采用瓊脂二倍稀釋法檢測24種抗菌藥物對87株鮑曼不動桿菌的耐藥表型；用RAPD分型方法分析多重耐藥鮑曼不動桿

3、菌的基因同源性。 (2)瓊脂二倍稀釋法測定外排泵抑制劑(利血平和CCCP)對氟喹諾酮類和氨基糖苷類抗菌藥物對鮑曼不動桿菌的抗菌活性的影響；初步探討鮑曼不動桿菌臨床分離株中外排泵的分布情況。 (3)設(shè)計外排蛋白(AdeABC)基因特異性引，PCR擴增多重耐藥鮑曼不動桿菌各克隆中外排蛋白基因，通過DNA測序及在GeneBank上進行序列比對分析測序結(jié)果，了解外排泵蛋白基因結(jié)構(gòu)；分析外排蛋白表達陽性菌株在耐藥表型方面的差異。

4、 (4)提取多重耐藥鮑曼不動桿菌外膜蛋白，進行SDS-PAGE分析，研究其與多重耐藥性的關(guān)系。 [結(jié)論] (1)北京地區(qū)醫(yī)院中多重耐藥鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類敏感性明顯下降，對其他藥物尤其是第三、四代頭孢菌素類及β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑敏感性也顯著降低，同時對磺胺類、氨基糖苷類耐藥率較高。 (2)本研究發(fā)現(xiàn)外排泵抑制劑利血平和CCCP均可增強氟喹諾酮類藥物的抗菌活性，尤以左氧氟沙星和加替沙星表現(xiàn)明顯，而對

5、氨基糖苷類藥物的影響并不很明顯。提示本研究所收集的多重耐藥鮑曼不動桿菌對氟喹諾酮類的耐藥與主動外排密切相關(guān)。 (3)RAPD結(jié)果顯示，68株多重耐藥鮑曼不動桿菌菌株中分6個克隆株，提示多重耐藥鮑曼不動桿菌菌株來源有很大差異，是由多個獨立來源發(fā)展而來的，可能與抗菌藥物選擇壓力相關(guān)。 (4)外排蛋白基因在多重耐藥鮑曼不動桿菌中表達陽性，其結(jié)構(gòu)與Genebank同源性達99％。 (5)多重耐藥鮑曼不動桿菌中外膜蛋白缺失