1、鮑曼不動桿菌是醫(yī)院感染的重要條件致病菌之一，在醫(yī)院環(huán)境中可長期存在，特別是機體抵抗力低下或免疫功能受損時更易出現(xiàn)相關(guān)的院內(nèi)感染。近年來隨著廣譜抗菌藥物的廣泛應用，耐碳青酶烯類的鮑曼不動桿菌日益增多，甚至出現(xiàn)了全耐藥株，給臨床醫(yī)療使用抗感染藥物帶來了新的挑戰(zhàn)。目前，整合子系統(tǒng)作為細菌耐藥產(chǎn)生及傳播的重要機制已經(jīng)得到了許多研究者的關(guān)注，越來越多的證據(jù)表明其與臨床多重耐藥菌株的產(chǎn)生及流行有著很密切的聯(lián)系。本課題分析鮑曼不動桿菌中整合子的存在特

2、點和流行趨勢，及研究金屬酶對碳青霉烯類藥物耐藥方面的作用機理，從而為臨床上選擇合理的抗生素提供理論依據(jù)。 本課題采用常規(guī)實驗室方法分離鑒定由臨床收集的鮑曼不動桿菌129株，用MIC和K-B法相結(jié)合的方法對該菌進行藥敏研究，了解細菌在醫(yī)院中的耐藥特點和分布情況。 設計不同的引物用PCR的方法擴增整合子及其可變區(qū)，以了解整合子在鮑曼不動桿菌中的分布特點及其攜帶的耐藥基因盒的種類。129株細菌中檢測出1類整合子74株（57.4

3、％），未檢出2、3類整合子。PCR擴增1類整合子可變區(qū)，發(fā)現(xiàn)其攜帶的基因盒以2000bp、2500bp、800bp和350bp大小的片段占優(yōu)。對PCR產(chǎn)物測序分析整合子所攜帶的基因盒類型，有五種：dfrⅦ，dfrAl-orfC、aacA4-aadB、dfrAl2-orfF-aadA2、aacA4-catB8-aadA1。 采用雙紙片增效法和協(xié)同法對耐亞安培南或美羅培南的65株細菌進行金屬酶的表型篩選，共檢出產(chǎn)金屬酶的細菌18株。

4、設計金屬酶基因IMP-1、VIM-2、SIM-1引物對細菌進行檢測。PCR擴增后檢測出VIM-2型，未檢出IMP-1和SIM-1型。經(jīng)DNA測序與網(wǎng)上Genbank序列同源性比較分析證實為VIM-2型金屬酶。 采用腸桿菌間重復序列PCR（ERIC-CR）的方法對65株亞胺培南或美羅培南耐藥的臨床菌株進行了基因分型的分析。確定其同源性，為進一步了解菌株的耐藥情況在院內(nèi)的流行趨勢和特點提供依據(jù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)檢出的菌株含有20種不同的基因