白菜型油菜EPSPs全長cDNA的克隆和原核表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、四川大學碩士學位論文白菜型油菜EPSPs全長cDNA的克隆和原核表達姓名：游大慧申請學位級別：碩士專業(yè)：遺傳學指導教師：李旭鋒20040501符合傳統(tǒng)的形態(tài)學分類的結論。將其推導蛋白質序列與上述8種植物的氨基酸做同源性比對，發(fā)現(xiàn)它與歐洲油菜和諸葛菜EPSPs的同源性都為95%，與擬南芥的為92，與西紅柿74，與煙草73，與華九頭獅子草和矮牽牛的為72，與水稻的同源性最低，為71%a設計一對引物:5CGGAATTCATGGCGCAAGCT

2、AGCAGAATC3，和5，一TTAGTGCTTTGTGATACTTTCAAGGAC3，用PCR方法將白菜型油菜EPSPs的編碼區(qū)擴增出來后插入到改造自Pharmacia公司的pGEX2T的表達載體GTK中，在大腸桿菌DH5。中用工PTG誘導成功地表達了EPSPs和谷膚營膚S一轉移酶(GST)的融合蛋白質EPSPsGST。試驗發(fā)現(xiàn)，用0.1mMIPTG誘導的效果優(yōu)于0.3mM0.5mM1mM的IPTG的效果:37℃的培養(yǎng)溫度比30℃的培

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