1、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)是引發(fā)斷奶豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)和豬的皮炎與腎病綜合征(PDNS)等有關(guān)疾病的重要病原.為深入研究PCV2的致病機(jī)理,該研究在國內(nèi)首次建立了PCV2特異性原位雜交檢測(cè)方法.參照GenBank發(fā)表的PCV2 ORF2基因序列設(shè)計(jì)引物,利用PCR擴(kuò)增得到341bp的核酸片段,用隨機(jī)引物法制備出地高辛標(biāo)記的核酸探針.特異性檢測(cè)結(jié)果表明,該探針與PCV1、PRRSV、PPV、PRV等不發(fā)生反應(yīng);敏感性檢測(cè)結(jié)果表

2、明,該探針可檢測(cè)的最低DNA含量為2pg.用PCV2 BF毒株人工感染10頭40日齡長白豬,分別于感染后第3、7、14、21、42天剖殺取材,制備多聚甲醛固定石蠟包埋的組織切片,用核酸探針檢測(cè)組織中的病毒分布.結(jié)果顯示,在人工感染后第3天,仔豬的淋巴結(jié)、胸腺、肺臟、脾臟、鼻粘膜中即出現(xiàn)陽性雜交信號(hào);第21天,肝臟、腎臟、心臟、腦、胃、回腸等組織出現(xiàn)陽性信號(hào).在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,會(huì)厭軟骨、膀胱、皮膚、肌肉等組織以及未感染對(duì)照豬組織均未檢測(cè)到