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文檔簡介
1、大豆作為重要的植物油脂和蛋白質(zhì)來源,在人類膳食中扮演著重要的角色。近年來,隨著種植面積的增加,商品化的轉(zhuǎn)基因大豆正占有越來越多的大豆交易市場。
受體基因型依賴是限制根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆遺傳轉(zhuǎn)化效率提高的重要因素。目前,主栽大豆品種遺傳轉(zhuǎn)化效率偏低,嚴(yán)重制約優(yōu)良轉(zhuǎn)基因材料的創(chuàng)制和品種選育效率。本實(shí)驗(yàn)以適宜我國不同地域種植的13個(gè)大豆主要栽培品種為材料,系統(tǒng)比較了其再生能力和根癌農(nóng)桿菌侵染轉(zhuǎn)化效率。分析了不同品種之間叢生芽誘導(dǎo)率與
2、芽伸長率之間的關(guān)系。研究結(jié)果表明,不同品種間的再生能力和轉(zhuǎn)化效率均存在顯著差異,但農(nóng)桿菌侵染對各品種叢生芽誘導(dǎo)率的影響較小。在進(jìn)行根癌農(nóng)桿菌侵染后,經(jīng)過篩選劑篩選,各品種的芽伸長率表現(xiàn)出明顯差異,從而影響到其轉(zhuǎn)化效率。研究中優(yōu)選到4個(gè)轉(zhuǎn)化效率較高的中國主栽大豆品種,中黃42和中黃39適宜于黃淮海等我國中部地區(qū)種植,桂夏3號適宜于在南方大豆區(qū)種植,疆莫豆1號適宜于東北地區(qū),其中高蛋白品種“中黃42”的轉(zhuǎn)化效率可達(dá)4.07%,為優(yōu)良轉(zhuǎn)基因大
3、豆材料的創(chuàng)制提供了更為理想的受體材料。
目前,在轉(zhuǎn)化過程中為了便于篩選陽性轉(zhuǎn)化植株,通常會(huì)使用篩選標(biāo)記基因。然而,由此所帶來的一些可能存在的潛在風(fēng)險(xiǎn),引起了比較大的爭議。由于植物缺乏利用亞磷酸鹽的基因,所以植物不能利用亞磷酸鹽。本研究利用亞磷酸鹽脫氫酶基因(ptxD)和亞磷酸鹽組成的篩選系統(tǒng),用于農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中陽性植株的篩選。結(jié)果表明,此篩選系統(tǒng)雖然具有一定的篩選效果,但是篩選效率較低,并不能很好的將陽性植株與非陽
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