綠竹和雷竹SOC1同源基因克隆和功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1)/AGL20(AGAMOS-LIKE20)是MADS-box家族一員,在植物開花過程中起著重要的調(diào)控作用,它能夠整合來自光周期途徑、春化途徑、自主開花途徑和赤霉素途徑中的信號,并與其它基因相互作用共同調(diào)節(jié)植物的開花時間以及花的類型和花分生組織。竹類植物開花時間具有不確定性,營養(yǎng)周期長,因此SOC1勺克隆對竹類植物的成花機(jī)理研究具有重要意義。本課題根據(jù)水稻、

2、小麥、玉米、高粱以及雷竹反轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫設(shè)計(jì)引物,采用RACE方法分別得到BoSOC1 cDNA全長1049bp和PvSOC1cDNA全長1025bp。高保真酶擴(kuò)增綠竹SOC1ORF區(qū)得到BoSOC15種片段,分別命名為BoSOC11-3,BoSOC11-5,BoSOC1 Q-2,BoSOC1 Q-8,BoSOC12-5。其中BoSOC11-3開放閱讀框?yàn)?66bp,編碼221個氨基酸;BoSOC11-5開放閱讀框?yàn)?69bp,編碼222

3、個氨基酸;BoSOC1 Q-2開放閱讀框?yàn)?72bp,編碼223個氨基酸;BoSOC1 Q-8開放閱讀框?yàn)?69bp,編碼222個氨基酸;BoSOC12-5開放閱讀框?yàn)?75bp,編碼224個氨基酸。高保真酶擴(kuò)增雷竹SOC1ORF區(qū),得到1條PvSOC1序列,PvSOC1開放閱讀框?yàn)?81bp,編碼226個氨基酸。
   通過序列比對發(fā)現(xiàn)BoSOC1和PvSOC1基因在植物中相當(dāng)保守,并且與禾本科植物可聚為一類。Real-Tim

4、e PCR結(jié)果表明BoSOC1在花芽中的表達(dá)量是營養(yǎng)芽中的12倍,而PvSOC1在開花雷竹地上部位中成熟葉中的表達(dá)量最高,在葉芽中的表達(dá)量最低;PvSOC1在不開花雷竹地上部位中葉芽中的表達(dá)量最高,在莖中的表達(dá)量最低。PvSOC1轉(zhuǎn)擬南芥功能驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)35S::PvSOC1擬南芥蓮座葉數(shù)量明顯少于野生型擬南芥,并且該轉(zhuǎn)基因株比野生株早開花6-7天,具有明顯的早花表型。轉(zhuǎn)基因株還表現(xiàn)出花型較小,一片花瓣在開花早期被花萼包裹,不能順利展開,表

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