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文檔簡介
1、中國水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)是多年生草本植物,石蒜科水仙屬,為我國的傳統(tǒng)名花之一,但是其花色單一、品種匱乏,限制了水仙產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。目前對中國水仙花色形成機(jī)理的研究尚不深入,其呈色的分子機(jī)理還不明確。MYB類轉(zhuǎn)錄因子在植物花色素形成過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控功能,現(xiàn)在大部分的研究成果都是轉(zhuǎn)錄激活子的應(yīng)用,這在許多植物中都得到廣泛的驗(yàn)證,然而對于花青素合成過程中存在的具有抑制作用的MYB轉(zhuǎn)錄因子的研
2、究卻很少。本研究以‘金盞銀臺’為材料,利用RT-PCR和RACE技術(shù)克隆出可能對其花色形成有調(diào)控作用的 MYB基因,通過熒光定量 PCR技術(shù)分析其在中國水仙成花過程中的不同時期的相對表達(dá)水平,并對其構(gòu)建反義表達(dá)載體,農(nóng)桿菌介導(dǎo)入水仙受體系統(tǒng),進(jìn)行相關(guān)的表達(dá)研究。研究結(jié)果對中國水仙的花色改良探索具有一定意義。主要研究結(jié)果如下:
1.利用同源克隆技術(shù)從中國水仙‘金盞銀臺’花瓣中克隆得到4條MYB基因,序列分析表明,MYB1基因全長
3、842bp,其中開放閱讀框共有681bp,編碼226個氨基酸,命名為NtMYB1,在Gengbank中的登錄號為KC763973;MYB2基因全長1067bp,其中開放閱讀框共有633bp,編碼210個氨基酸,命名為NtMYB2,在GeneBank中的登錄號為KC763974;MYB3基因全長805bp,其中開放閱讀框共有606bp,編碼201個氨基酸,命名為NtMYB3,在GeneBank中的登錄號為KC763975;MYB4基因全長
4、1182bp,其中開放閱讀框共有855bp,編碼284個氨基酸,命名為NtMYB4,在GeneBank中的登錄號為KC763976。
2.以中國水仙 Actin基因?yàn)閮?nèi)參基因,通過熒光定量轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析發(fā)現(xiàn),4個MYB基因在中國水仙成花過程中的表達(dá)水平均有明顯差異。除了花苞期表達(dá)量很低,NtMYB1基因在其他5個時期的表達(dá)量都很高,且呈現(xiàn)逐步下降的趨勢;NtMYB2基因的表達(dá)水平隨著花形成的時間推移而下降,且在盛花期、開花后期和
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