普通小麥Myb和Dof轉(zhuǎn)錄因子家族基因的克隆和表達(dá)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、轉(zhuǎn)錄調(diào)控是植物生長(zhǎng)發(fā)育、逆境反應(yīng)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、抗病性等一系列基因表達(dá)的最主要調(diào)控形式,轉(zhuǎn)錄因子是參與基因轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控過(guò)程的重要反式因子.小麥?zhǔn)鞘澜绲诙蠹Z食作物,但其轉(zhuǎn)錄因子研究遠(yuǎn)遠(yuǎn)滯后于其它植物.該文采用簡(jiǎn)并引物同源擴(kuò)增及電子克隆方法,分析了植物Myb和Dof轉(zhuǎn)錄因子家族基因在普通小麥中的結(jié)構(gòu)及其表達(dá),以期從轉(zhuǎn)錄調(diào)控水平上增加對(duì)小麥生長(zhǎng)發(fā)育,生物進(jìn)化等過(guò)程的認(rèn)識(shí),主要結(jié)果如下:1)研究發(fā)現(xiàn),小麥中至少存在23個(gè)Myb同源基因,并且廣泛表

2、達(dá)于小麥的根、莖、葉及授粉后不同時(shí)間的種子中.小麥中大部分Myb成員在DNA結(jié)合域(R2R3區(qū))的構(gòu)型為W-x(19)-W-x(19)-W-x(12)-F-x(18)-W-x(18)-W,系統(tǒng)分析證明,小麥中存在一些明顯不同于其它植物的Myb基因成員.2)通過(guò)電子克隆的方法,首次從小麥中獲得了六個(gè)含完整ORF的Myb基因TaMybl-TaMyb6,其預(yù)測(cè)氨基酸序列的結(jié)構(gòu)分析表明,它們均具有植物Myb轉(zhuǎn)錄因子的特征,包含完整HLH特征的D

3、NA結(jié)合域,TaMyb2和TaMyb4含有典型的核定位信號(hào),有些成員包括一個(gè)或多個(gè)激活域.3)首次對(duì)這六個(gè)基因的組織表達(dá)特性進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:不同成員在同一品種根、莖葉及種子的不同發(fā)育階段表達(dá)水平不同.赤霉素誘導(dǎo)和PEG脅迫實(shí)驗(yàn)證明,在三葉期根組織中,有些成員的表達(dá)明顯受PEG脅迫的影響,但僅TaMyb3的表達(dá)受赤霉素(GA)信號(hào)的抑制作用.4)TaMyb1-TaMyb6基因在小麥親本與雜交種之間的表達(dá)分析表明,在營(yíng)養(yǎng)器官(根,莖,

4、葉)及授粉后六天至十二天的種子中,六個(gè)成員在親本和雜交種間表達(dá)模式包括:偏高親、與雙親表達(dá)一致及雜交種減弱等多種不同形式.5)TaMybl和TaMyb2的擬南芥轉(zhuǎn)化的初步結(jié)果顯示,TaMybl和TaMyb2的過(guò)表達(dá)導(dǎo)致一些植株葉片顏色變化,有些植株表現(xiàn)致死.6)該研究采用電子克隆,結(jié)合RT-PCR方法,在小麥中獲得了一個(gè)Dof家族基因TaDofl,分析了其在小麥不同組織器官,以及種子不同發(fā)育階段的表達(dá)特性,并初步探討了TaDofl基因在

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