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3、絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論支作者簽名:了獻(xiàn)簽字日期:U\年f月I_VEt導(dǎo)師簽名:嵴鄉(xiāng)專簽字日期:跏11年j月/占日玉米中WRKY轉(zhuǎn)錄因子的克隆與表達(dá)分析玉米中WRKY轉(zhuǎn)錄因子的克隆和表達(dá)分析細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)研究生武琳指導(dǎo)教師王亞男副教授摘要:WRKY轉(zhuǎn)錄因子家族是最大的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,而且由WRKY轉(zhuǎn)錄因子家族形成的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)參與了多種信號(hào)調(diào)節(jié)過程?,F(xiàn)有研究表明,WRKY轉(zhuǎn)錄因子在抵御生物脅迫
4、和非生物脅迫、種子的生成和萌發(fā)、衰老等過程中都發(fā)揮了重要的作用。本研究對(duì)玉米Q319中的WRKY轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行克隆探討其在抵抗干旱和高鹽非生物脅迫下的作用。選用玉米Q319的基因組DNA作為玉米WRKY轉(zhuǎn)錄因子克隆的模板。采用多種高保真酶克隆了12個(gè)WRKY轉(zhuǎn)錄因子基因,并進(jìn)行測(cè)序。根據(jù)測(cè)序結(jié)果,預(yù)測(cè)mRNA序列分析。結(jié)果表明:克隆得到12個(gè)WRKY基因中每個(gè)基因僅含有一個(gè)WRKY結(jié)構(gòu)域,且與已知的其它物種的WRKY基因相似性不高。查找并
5、用PlantCARE在線分析軟件分析啟動(dòng)子的順式作用元件。結(jié)果表明:克隆得到的啟動(dòng)子中含有多種與干旱脅迫、冷脅迫、熱脅迫及激素脅迫等相關(guān)的順式作用元件。用16%的PEG和150mMNaCl處理玉米Q319和DH65232,處理2h、6h、12h、24h、48h及復(fù)水后24h取材,提取RNA作為RealtimePCR的模板,進(jìn)行基因表達(dá)分析。結(jié)果表明:不同處理?xiàng)l件下,不同品種的玉米其不同組織中WRKY基因的表達(dá)量發(fā)生了相應(yīng)的變化。其中,Z
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