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![擬南芥轉(zhuǎn)錄因子WRKY超家族進(jìn)化分析.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-2/24/12/12b9f83b-9173-4dae-b21e-16de0ebc61ad/12b9f83b-9173-4dae-b21e-16de0ebc61ad1.gif)
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1、目的:廣泛的研究擬南芥中WRKY轉(zhuǎn)錄因子,以期發(fā)現(xiàn)該家族成員在擬南芥中進(jìn)化機(jī)制。為最終闡明該家族成員在整個(gè)植物界的進(jìn)化規(guī)律奠定基礎(chǔ)。 方法從TAIR網(wǎng)站下載擬南芥的基因組序列,采用BLASTN和TBALSTN搜索工具和WRKY的搜索基因組序列,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行ORF預(yù)測(cè);獲得的cDNA序列對(duì)NCBI的Map的Viewer和TAIR的MapViewer進(jìn)行染色體的定位;根據(jù)TIGR提供的數(shù)據(jù),對(duì)內(nèi)含子和外現(xiàn)子的結(jié)構(gòu)手工校正及相位進(jìn)行分
2、析;根據(jù)SMART蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)分析,同時(shí)采用Interpro數(shù)據(jù)庫(kù)以及SWISSproein數(shù)據(jù)庫(kù)輔助數(shù)據(jù)分析對(duì)WRKY基因的進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析;WRKY基因的系統(tǒng)樹(shù)構(gòu)建選取編碼保守域的氨基酸。所有的序列用Clustal1.8進(jìn)行多重比較,比較的結(jié)果用Neighbor-joining(NJ)的建樹(shù)方法進(jìn)行系統(tǒng)樹(shù)構(gòu)建,Gap的去處采用比對(duì)去除,氨基酸的替換模型采用PossionCorrection方法,同時(shí)考慮Gamma距離,Gamma系數(shù)的估
3、計(jì)采用Yang的方法,建樹(shù)工具位MEGA3,對(duì)于樹(shù)的評(píng)估采用BootStrap法,共重復(fù)1000次。 結(jié)果:(1)數(shù)據(jù)庫(kù)搜索的結(jié)果一共獲得78個(gè)不同的可能編碼蛋白質(zhì)的cDNA,且發(fā)現(xiàn)在Somssich報(bào)告的數(shù)據(jù)中,WRKY38(At5g22570)的序列證明有誤; (2)繪制了ATWRKY基因的蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)圖,首次發(fā)現(xiàn)在ATWRKY48,ATWRKY49,ATWRKY72存在LeucineZip結(jié)構(gòu); (3)
4、對(duì)ATWRKY基因的基因組進(jìn)行定位、內(nèi)含子進(jìn)行相位分析、ATWRKY基因的進(jìn)化樹(shù)分析,表明在擬南芥的WRKY基因進(jìn)化中存在大量的基因復(fù)制的現(xiàn)象,進(jìn)而經(jīng)過(guò)功能的分化,從而形成一個(gè)超級(jí)家族,其進(jìn)化的形式多樣,有可能有轉(zhuǎn)位的基因,也有可能有染色體的復(fù)制;WRKY基因在經(jīng)過(guò)基因的復(fù)制之后的分化過(guò)程中,不僅獲得了新的啟動(dòng)子,同時(shí)整合了其他的功能域。 結(jié)論:1.WRKY基因主要通過(guò)基因復(fù)制的方式快速進(jìn)化 2.WRKY基因通過(guò)整合不同
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