1、研究背景:水稻是世界上一半以上人口的主糧，也是研究單子葉植物的模式生物。水稻產(chǎn)量與世界糧食問題密切相關(guān)，每年由于病害造成的減產(chǎn)高達(dá)10～15％。白葉枯病是對水稻危害最嚴(yán)重的細(xì)菌性病害，目前，控制病害最有效的方法就是培育水稻的抗病品種。Xa21是水稻中的廣譜抗白葉枯病基因，通過識別致病菌中的無毒決定子介導(dǎo)水稻的固有免疫應(yīng)答。WRKY是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族，廣泛參與植物體生長發(fā)育、脅迫應(yīng)答和新陳代謝等生理過程，起正調(diào)控或負(fù)調(diào)控的作用。在X

2、a21介導(dǎo)的抗白葉枯病途徑中，許多WRKY因子參與調(diào)控下游防御相關(guān)基因，如PR1基因等的表達(dá)， WRKY蛋白質(zhì)之間，或通過與其它基因、蛋白質(zhì)或小分子互作，介導(dǎo)靶基因的轉(zhuǎn)錄。廣泛研究水稻固有免疫系統(tǒng)豐富發(fā)展了水稻這一重要農(nóng)作物的理論知識，對提高糧食產(chǎn)量有著積極深遠(yuǎn)的意義，因而成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)，而對WRKY轉(zhuǎn)錄因子家族的深入研究，正是為了解水稻抗病機(jī)理提供了重要的基礎(chǔ)。
　　 研究目的:分別檢測WRKY蛋白質(zhì)在水稻生長發(fā)育過程中，

3、與白葉枯病菌互作過程中的表達(dá)豐度變化，對比WRKY蛋白質(zhì)在不同處理的水稻葉片中的表達(dá)模式差異，篩選參與水稻抗白葉枯病的WRKY因子，為進(jìn)一步研究其功能奠定了基礎(chǔ)。
　　 材料與方法:用水稻黃單胞菌分別對水稻抗病品種和感病品種進(jìn)行接菌試驗(yàn)及對照試驗(yàn)（接水），接種后在不同時(shí)間點(diǎn)采集水稻葉片材料并提取總蛋白質(zhì)。針對所選WRKY蛋白質(zhì)的特異氨基酸序列設(shè)計(jì)多克隆抗體，利用Western Blotting方法分別對不同時(shí)間點(diǎn)、不同處理的水稻

4、葉片內(nèi)WRKY蛋白質(zhì)表達(dá)豐度進(jìn)行檢測。
　　 結(jié)果:在水稻正常生長的葉片中，OsWRKY12、43、55和86在苗期表達(dá)豐度較低，隨葉片生長逐漸升高;OsWRKY50和84在苗期葉片中的表達(dá)豐度相對較高，進(jìn)入成熟期后下調(diào)，OsWRKY40/64和52在葉片中未檢測到可見信號。在水稻與黃單胞菌互作反應(yīng)中，OsWRKY40/64、50和52受黃單胞菌誘導(dǎo)表達(dá)，OsWRKY84受侵染后表達(dá)量也略有增加，OsWRKY12、43、55和8