1、miRNA是內(nèi)源的非編碼小RNA，主要長(zhǎng)度在18nt-25nt，在轉(zhuǎn)錄水平上抑制翻譯或者降解靶基因來(lái)調(diào)控mRNA的表達(dá)。miRNA在植物和動(dòng)物基因的表達(dá)中都起到重要的調(diào)控作用(Unver et al.，2009)，在植物中，miRNA主要與生長(zhǎng)發(fā)育(David et al.，2004)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(Jones et al.，2006)、蛋白降解(Chen et al.，2005)和抑制環(huán)境脅迫、病菌侵染(Zhang et al.，2006

2、)等有關(guān)。
　　隨著蘋果栽培品種的不斷更新，富士蘋果已經(jīng)成為我國(guó)的主要栽培品種。在我國(guó)蘋果的主要產(chǎn)區(qū)，每年由于各種病害的發(fā)生，導(dǎo)致蘋果產(chǎn)業(yè)遭受了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。蘋果輪紋病(Apple ring rot)是當(dāng)前蘋果生產(chǎn)上最嚴(yán)重的病害之一，而目前的主栽品種富士蘋果是蘋果輪紋病的易感品種。湖北海棠是一種重要的蘋果砧木，對(duì)蘋果輪紋病有較好的抗性。比較感病品種富士蘋果和抗病品種湖北海棠的miRNA，對(duì)于研究和提高主栽品種富士蘋果對(duì)蘋果輪紋病

3、的抗性有著重要的意義。
　　主要研究成果如下:
　　1.通過高通量測(cè)序富士蘋果未經(jīng)處理的莖，我們發(fā)現(xiàn)了165個(gè)miRNA屬于49個(gè)miRNA家族，對(duì)這些已知家族的miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)，預(yù)測(cè)結(jié)果表明靶基因大多編碼轉(zhuǎn)錄蛋白，這一結(jié)果與其他植物中的研究結(jié)果相類似。此外，我們還預(yù)測(cè)了380個(gè)新的候選miRNA，并用半定量PCR檢測(cè)了其在莖和葉中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)具有組織器官的特異性。本研究發(fā)現(xiàn)的已知家族的miRNA和新的候選mi

4、RNA在進(jìn)一步研究富士蘋果生長(zhǎng)發(fā)育中起著重要作用。
　　2.通過高通量測(cè)序湖北海棠未經(jīng)處理的莖，發(fā)現(xiàn)165個(gè)miRNA屬于52個(gè)miRNA家族，對(duì)這些已知家族的miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)，預(yù)測(cè)結(jié)果表明靶基因大多編碼轉(zhuǎn)錄蛋白，這一結(jié)果與其他植物中的研究類似。此外，我們還預(yù)測(cè)了821個(gè)新的候選miRNA，并用半定量PCR檢測(cè)了表達(dá)量高的新候選miRNA在莖和葉中的表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)具有組織器官的特異性。本研究發(fā)現(xiàn)的已知家族的miRNA

5、和新的候選miRNA為研究湖北海棠收集、保存、評(píng)價(jià)和利用提供了科學(xué)依據(jù)。
　　3.通過高通量測(cè)序比較蘋果輪紋病抗性不同品種富士蘋果和湖北海棠中的miRNA，發(fā)現(xiàn)了11個(gè)差異表達(dá)的miRNA，與富士比其中湖北海棠9個(gè)miRNA是上調(diào)表達(dá)的，2個(gè)miRNA是下調(diào)表達(dá)的，分析了miRNA靶基因的功能，發(fā)現(xiàn)與植物逆境脅迫相關(guān)，這表明這些miRNA可能與蘋果輪紋病抗性相關(guān)的。對(duì)進(jìn)一步提高主要栽培品種富士蘋果抵抗蘋果輪紋病具有重要的意義。