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![IBDV弱毒株雞體傳代毒基因序列與毒力關(guān)系的比較研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/79cd5669-b8e8-4d38-b696-c501e83fbfbf/79cd5669-b8e8-4d38-b696-c501e83fbfbf1.gif)
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1、獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下,進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本學(xué)位論文的研究成果不包含任何他人創(chuàng)作的、己公開(kāi)發(fā)表或者沒(méi)有公開(kāi)發(fā)表的作品的內(nèi)容,也不包含為獲得中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本論文所涉及的研究工作做出貢獻(xiàn)的其他個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:宮世葭2。燁年6月(7日關(guān)于論文
2、使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:中監(jiān)所有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán),允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽名:官世在時(shí)間:zoti4年6月日剔噬轢身踺艇:川諺。乒≥日中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所碩士學(xué)位論文ABSTRACTABSTRA
3、CTInfectiousbursaldisease(IBD)isanacuteandhighlycontagiousviraldiseaseofyoungchickenscausedbyInfectiousbursaldiseasevirus(IBDV)TheepidemicofveryvirulentIBDVstrainsinthe1atel980smakethecauseofthevirulencevariationofIBDVbe
4、comethefocusofresearchButsofarthevirulencefactorofIBDVwasnotclearInordertoprovidemoremolecularbasisforthevirulenceofIBDvtheattenuatedIBDVstrainswereseriallypassagedinspecificpathogen—free(SPF)chickensinthisstudyandthegen
5、omesequencesoftheattenuatedⅢDVstrainsandthepassagestrainsinchickenswereamplifiedandanalyzedAtthesametimetheIBDVE2strainwaspassaged4successivetimesinchickenembryo,andthethegenomesequencesoftheE2strainandthepassagestrainsi
6、nchickenembryoweTeamplifiedandanalyzedThemainresultsinthisstudyareasfollows:(1】TwoattenuatedIBDVstrainswerepassagedfiveorsixtimesinSPFchickensBothattenuatedstrainsincreasedinvirulenceduringthepassageinsusceptiblechickens
7、asevidencedbythedecreaseinbursa/bodyweightratiosandB:Bindex(2)ThegenomesequencesoftheattenuatedmDVstrainsandthepassagestrainsinchickensweresegmentallyamplifiedbyR]rPCRandmolecularclonetechnologyAdirectsequencealignmentan
8、alysisresultsshowedthatthegenomeBsegmentwereconservativewithnonucleotidemutationduringthepassageinchickens;however,therewere5nueleotidemutationsingenomeAsegment,whichresultedin3aminoacidsubstitutionsatposition80(fromRtoG
9、)、125(fromPtoS1andl30(fromCt)invP5,加aminoacidsubstitudonatposition253(fromHtoQorN)inVP2andanaminoacidsubstitutionatposition778(fromVtoM)inVP3Furtherhomologousanalysisdemonswatedthatthemutationofaminoacidatposition253inVP
10、2madethestrainsafterpassageinchickenshaveahigheridentitywiththeclassicalstrainsandtheveryvirulentstrains,andaloweridentitywiththeattenuatedstrains;Thoseresultssuggestedthatthemutationofaminoacidat253siteinVP2maybeoneofth
11、emolecularmechanismofIBDVvirulenceenhancementduringthepassageinchickensThe3DstructurepredictionofVP2revealedthataminoacidresidueatposition253exposedatthesurfaceofVP2projecdondomaindemostratingtheaminoacidmutationfromHtoQ
12、orNatthissitemayimproveitshydrophilicitywhichmayfacilitatetheinteractionbetweenmDVandthecellreceptorinthehost,soastoincreasethepathogenicityofIBDV(3)SequenceanalysisoftheIBDVE2strainanditspassagestrainsinchickenembryosho
13、wedthatthereweresomeuniqueaminoacidsvariationinVP2betweentheclassicalstrainsandtheattenuatedstrains:253(Q’H)、279(DN)、284(A—T)、330(SR),whichfurtherelucidatedthemolecularmechanismofIBDVvimlenceagenuationduringthepassageinc
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